Author/Authors :
قديمي پور، رحيم نويسنده Department of Research & Development, Razi Vaccine and Serum Research Institute, Marand, Iran Ghadimipour, R. , خليلي، ايرج نويسنده , , آمقي رودسري، علي نويسنده موسسه تحقيقات واكسن و سرم سازي رازي شعبه شمال غرب كشور, Ameghi Roodsary, A , مسعودي ، شهين نويسنده , , صديق اعتماد ، سعيد نويسنده Department of Research & Development, Razi Vaccine and Serum Research Institute, Marand, Iran Sedigh-Eteghad, S. , ابراهيمي، محمد مجيد نويسنده ,
Abstract :
بيماري آنفلوانزاي پرندگان سويه H9N2، به دليل ميزان اپيدمي بالا و خسارات اقتصادي حاصل از تاثير ويروس بر رشد و توليد گله ها و تلفات شديد، مشكلي جدي در صنعت طيور به حساب مي آيد. در حال حاضر مناسب ترين روش پيشگيري از اين بيماري، واكسيناسيون طيور است كه واكسن غير فعال آن با تكثير ويروس در جنين تخم مرغهاي نطفه دار توليد مي شود. براي توليد واكسني با بالاترين تيتر ويروسي و بيشترين قدرت ايمني زايي، اطلاع دقيق از منحني رشد ويروس ضروري به نظر مي رسد. به اين منظور در مطالعه حاضر سويه واكسينال ويروس آنفلوانزاي پرندگان H9N2 در تخم مرغ هاي SPF تلقيح گرديد. تلقيح از رقت 5-10 به ميزان 1/0 ميلي ليتر و بصورت داخل آلانتوييك در 336 تخم مرغ جنين دار 11 روزه صورت پذيرفت. انكوباسيون در دماي 37 درجه سانتي گراد و رطوبت 60 درصد انجام گرديد و در نهايت تخم مرغ ها به صورت تصادفي در گروه هاي 7 تايي تقسيم بندي شدند. مايع آمنيو آلانتوييك و پرده هاي كوريوآلانتوييك هر گروه هر 2 ساعت يكبار تا 96 ساعت نمونه برداري شدند و به روش HA و EID50 مورد ارزيابي قرار گرفتند. نتايج اخذ شده نشان دادند تيترهاي HA و EID50پرده هاي كوريوآلانتوييك به ترتيب در ساعت هاي 26 و 24 بعد از تلقيح به تيتر مناسب براي توليد آنتي ژن رسيد. همچنين تيترهاي HA و EID50 مايع آلانتوييك به ترتيب در ساعت هاي 66-38 و 58-28 بعد از تلقيح در تيتر مناسب استحصال آنتي ژن قرار گرفت. بنابراين بهترين زمان براي برداشت ويروس آنفلوانزاي پرندگان سويه H9N2 به منظور ساخت واكسن مابين ساعات 50 الي 60 بعد از تلقيح مي باشد. بهينه سازي زمان برداشت ويروس در توليد واكسن مي تواند منجر به افزايش ميزان توليد، ايمني زايي بيشتر و صرفه اقتصادي گردد.
Abstract :
Knowledge of virus and replication kinetic is one of the most important issues in the vaccine production. The present study aimed to evaluate the best harvesting time of H9N2 avian influenza virus (AIV) vaccine strain inoculated in specific pathogen free (SPF) embryonated chicken eggs (ECE)s. For this purpose, 10-5 dilution of AIV (A/Chicken/Iran/99/H9N2) was inoculated into 336, 11-day old ECEs at the rate of 0.1 ml/ECE via intera-allantoic. Amnio-allantoic fluid (AAF) and chorioalantoic membranes were collected at 2 hours intervals up to 96 post inoculations from 7 eggs in each trial. The presence of virus in the harvested suspensions was evaluated by Hemagglutination assay (HA) and Egg infective dose 50 (EID50) assays. Our results showed that, the best virus harvesting time for vaccine production is between 50 – 60 hours post inoculation (hpi) in ECEs. This finding may provide possibility of the sufficient and increasing rate of production, immunogenicity and economic factors in H9N2 influenza vaccine production.
