Applying conserved peptides of NS1 Protein of avian influenza virus to differentiate infected from vaccinated chickens

آنفلوانزاي مرغي (AI) يك بيماري بسيار مسري در طيور است كه شيوع بيماري مي تواند پيامدهاي چشمگيري در اقتصاد و سلامت داشته باشد. جهت نظارت موثر بر بيماري ها، نياز به سنجش سريع و حساس آنتي بادي عليه پروتيين ويروس آنفولانزا جهت تشخيص مي باشد. به منظور ريشه كن كردن عفونت آنفلوانزاي مرغي در طيور و اجراي واكسيناسيون با پيشنهاد سازمان هاي بين المللي بكارگيري استراتژي DIVA، امكان تمايزطيور آلوده از واكسينه شده را فراهم مي كند. بدين منظور سيستمي بر اساس تشخيص آنتي بادي عليه پروتيين هاي غير ساختاري (NS1) ويروس آنفولانزاي پرندگان پيشنهاد شده است، تادر صورت بروز بيماري در گله ي واكسينه شده امكان تشخيص طيور آلوده وجود داشته باشد. در اين پروژه از دو پپتيد حفاظت شده پروتيين NS1 جهت طراحي يك روش الايزا بهره برداري شده است. اين روش الايزا كه بر مبناي پپتيد مي باشد، مي تواند سرم آلوده و واكسينه شده را با توجه به تيتر آنتي بادي تفكيك نمايد. تجربه حاضر نشان ميدهد با تست الايزا بر پايه پپتيد پروتيين NS1 مي توان تيتر آنتي بادي در طيور واكسينه و آلوده را سنجش نمود. اين يافته ها تفاوت قابل توجهي در تكرار ويروسي در جوجه ها را نشان مي دهد كه نتيجه تنوع در توليد آنتي بادي عليه NS1 است كه به عنوان روش تشخيصي براي شناسايي، مبتني بر پپتيد مي باشد. اين نتايج روشي اختصاصي جهت تشخيص آنتي بادي را ارايه مي دهد كه ارزش تشخيصي براي صنايع مرغداري دارد.

Avian influenza (AI) is a highly contagious disease in poultry and outbreaks can have dramatic economic and health implications. For effective disease surveillance, rapid and sensitive assays are needed to detect antibodies against AI virus (AIV) proteins. In order to support eradication efforts of avian influenza (AI) infections in poultry, the implementation of “DIVA” vaccination strategies, enabling the Differentiation of infected from Vaccinated Animals have been recommended by international organizations. A system, based on the detection of antibodies to the Non-Structural (NS1) protein of AI has been proposed to enable the detection of field exposure in vaccinated flocks, and through this detection, infected flocks may be properly managed. In this project we have used two conserved peptides of NS1 protein to develop a peptide based ELISA method. This ELISA could screen the infected and vaccinated sera due to their titer of antibody. Following experimentally infection and vaccinate of chickens, antibodies to the peptides of the NS1 protein were detected by enzyme-linked immuno sorbent assay (ELISA). These findings indicate that there is a significant difference in the viral replication in chickens, resulting in a variation in the production of antibodies to NS1, as detected by the peptide- based ELISA used. These results demonstrate the specific ELISA for anti NS1 antibodies that have diagnostic value for the poultry industries.