Author/Authors :
اسكوبدو-گواِرا، ماركوس رامسس نويسنده Veterinary Microbiology Laboratory, National School of Biological Sciences, National Polytechnic Institute, Plan de Ayala y Prol. Carpio, Col. Casco de Sto Tom?s, C. P. 11340, México, D. F., Mexico Escobedo-Guerra, M. R. , دي هارو-كروز، ماريا دي جسوس نويسنده Veterinary Microbiology Laboratory, National School of Biological Sciences, National Polytechnic Institute, Plan de Ayala y Prol. Carpio, Col. Casco de Sto Tom?s, C. P. 11340, México, D. F., Mexico de Haro-Cruz, M. J. , گواِرا-اينفانته، فرناندو مارتين نويسنده Veterinary Microbiology Laboratory, National School of Biological Sciences, National Polytechnic Institute, Plan de Ayala y Prol. Carpio, Col. Casco de Sto Tom?s, C. P. 11340, México, D. F., Mexico Guerra-Infante, F. M. , لوپز-هورتادو، مارسلا نويسنده Bioinmunology Molecular Laboratory, Department of Infectology, National Institute of Perinatology, Montes Urales 800, Col. Lomas Virreyes, C. P. 11000, México, D. F., Mexico L?pez-Hurtado, M.
Abstract :
آرماديلو به عنوان يک مدل تجربي مناسب براي مطالعه جذام در نظر گرفته مي‌شود. سلول‌هاي ميزبان اصلي ميکوباکتريوم لپره‌آ، ماکروفاژها و سلول شوان مي‌باشند. با اين حال، فعاليت اندوسيتوز و ميکروب‌کشي ماکروفاژها و مونوسيت‌هاي آرماديلو هنوز ارزيابي نشده است. هدف از اين پژوهش، بررسي اندوسيتوز و فعاليت احياء NBT ماکروفاژهاي مشتق از مونوسيت (MDM) و مونوسيت‌هاي به دست آمده از آرماديلوهاي غير آلوده، همچنين تعيين سطح فاکتور نکروز دهنده تومور (TNF) در طول تحريک با فوربول ميريستات استات (PMA) بود. سلول‌هاي تک هسته‌اي خون محيطي به روش ficoll-hypaque خالص شدند. مونوسيت‌هاي به دست آمده به وسيله انكوبه كردن به مدت 8 روز در محيط RPMI-1640 حاوي مکمل سرم جنين گوساله در دماي 37 درجه سانتيگراد به ماکروفاژهاي مشتق از مونوسيت تبديل شدند. فعاليت اندوسيتوز و احياء NBT به وسيله هضم مخمري ارزيابي شدند. توليد TNF به وسيله تحريک با PMA در سلول‌هاي L-922 مورد بررسي قرار گرفت. نتايج نشان داد که فعاليت اندوسيتوز MDM و مونوسيت‌هاي آرماديلو به ترتيب 11/4% ± 77/71 و 9/6% ± 66/60 (P<0.001) و فعاليت احياء NBT به ترتيب 79/4% ± 57/16 و 08/4% ± 66/17 بود. با اضافه شدن IFNγ نو ترکيب انساني براي 24 ساعت، اندوسيتوز و احياء NBT به وسيله MDM به ترتيب 17/6% ± 92/89 (P<0.001) و 31/4% ± 42/36 (P<0.001) بود. در مقايسه با سلول‌هاي 937-U انساني، وقتي MDM و مونوسيت‌هاي آرماديلو با 25 و 50 ng/ml PMA تحريک مي‌شوند، ميزان TNF كمتري توليد مي‌شود (ml/U 10). در نتيجه، وقتي MDM و مونوسيت‌هاي آرماديلو با PMA تحريک مي‌شوند، فعاليت‌هاي کاهش يافته‌اي را در مکانيسم‌هاي اکسيداتيو باکتريايي و توليد TNF نشان مي‌دهند.
Abstract :
The armadillo could be considered as an experimental model for leprosy studies. Mycobacterium leprae main host cells are macrophages and Schwann cells. However, endocytosis and germicidal activities of armadillo macrophages and monocytes have not yet been evaluated. The aim of this research was to evaluate endocytosis and NBT-reduction activities of monocyte-derived macrophages (MDM) and monocytes from non-infected armadillos, as well as to determine tumor necrosis factor (TNF) levels during stimulation with phorbol myristate acetate (PMA). Mononuclear cells of peripheral blood were purified using the ficoll-hypaque technique. The monocytes obtained were transformed to MDM after being incubated for 8 days in an RPMI-1640 medium supplement with fetal calf serum at 37 C. Endocytosis and NBT-reduction were evaluated by yeast ingestion. TNF production by stimulation with PMA was evaluated through a bioassay with L-929 cells. The results revealed an endocytosis of 71.77 ± 4.11% and 60.66 ± 6.9% (P<0.001) for armadillo MDM and monocytes respectively, whereas NBT-reduction was 16.57 ± 4.79% and 17.66 ± 4.08%, respectively. With the addition of recombinant human IFNγ for 24 h, endocytosis and NBT reduction by MDM were 89.92 ± 6.17% (P<0.001) and 36.42 ± 4.31% (P<0.001), respectively. Low levels of TNF are produced (10 U/ml) when MDM and armadillo monocytes are stimulated with 25 and 50 ng/ml of PMA, in comparison with human U-937 cells. In conclusion, MDM and armadillo monocytes show diminished activities in oxidative bactericidal mechanisms and in TNF production when stimulated with PMA.
