The effect of seminal plasma on the quality of coated ram frozen-thawed spermatozoa

به منظور بررسي اثر مجاورت مايع مني با اسپرم انزالي و اپيديديمي دو آزمايش انجام شد. آزمايش 1، دو انزالي متوالي ظرف مدت 5 دقيقه جمع‌آوري شد که انزال دوم در لوله محتوي رقيق کننده فيزر جمع‌آوري شد (اسپرم پوشش‌دار شده) و به وسيله سانتريفوژ مايع مني حذف گرديد. رسوب به سه بخش تقسيم شد و مقدار صفر، 50 و 100% مايع مني (حجم/حجم) به هر بخش اضافه شد و سپس نمونه‌ها منجمد شدند. نمونه‌ها بعد از يخ گشايي به مدت 6 ساعت در C37 نگهداري شدند. بعد از 6 ساعت ذخيره سازي، بيشترين تحرک پيشرونده (41/10%) و بيشترين سلامت غشاء پلاسمايي (62/12%) در اسپرم پوشش‌دار شده بدون مايع مني مشاهد شد (P<0.05). بيشترين زنده ماني در زمان صفر (9/24%) و 6 ساعت (17%) ذخيره سازي مربوط به اسپرم‌هاي پوشش‌دار شده بدون مايع بود (P<0.05). آزمايش 2، اسپرم اپيديديمي بعد از استخراج و تجميع، به سه قسمت تقسيم شد و مقدار صفر، 50 و 100% مايع مني به آن‌ها اضافه شد و سپس نمونه‌ها منجمد شدند. اسپرم‌هاي اپيديديمي بعد از يخ گشايي به مدت 6 ساعت در C37 نگهداري شدند. بيشترين (3/33%) و کمترين (25%) تحرک پيشرونده در زمان صفر ذخيره سازي به ترتيب در اسپرم‌هاي اپيديديمي بدون مايع مني و 100% مايع مني مشاهد شد (P<0.05). بيشترين (37/19%) و کمترين (38/9%) زنده ماني در زمان 6 ذخيره سازي به ترتيب مربوط به اسپرم اپيديديمي بدون مايع مني و 100% مايع مني بود (P<0.05). اين پژوهش نشان داد که افزودن مايع مني به اسپرم پوشش‌دار شده و اپيديديمي آثار مخرب انجماد را تشديد مي‌کند.

Two experiments were designed to examine the effects of crude seminal plasma (CSP) exposure of ejaculated and epididymal spermatozoa before freezing. Experiment 1, two consecutive ejaculates were collected (n=4) within 5 min, the second one was carried out in a tube containing Fiser extender (coated spermatozoa); by centrifugation, seminal plasma was removed from coated ejaculates. The pellets were split into three parts and 0, 50 and 100% CSP (v/v) was added and they were frozen. Samples were thawed and incubated at 37 C for 6 h. The highest progressive motility (10.41%) and the highest hypo-osmotic responses (12.62%) were found for the coated spermatozoa without CSP at 6 (P<0.05). The maximum viability was found for coated spermatozoa without CSP at 0 (29.4%) and 6 (17%, P<0.05). Experiment 2, epididymal spermatozoa were recovered (n=6), pooled and split into three fractions and 0, 50 and 100% CSP and the diluents were added, after that they were frozen. Thawed epididymal spermatozoa were incubated at 37 C for 6 h. The highest (33.3%) and lowest (25%) progressive motility were found for the epididymal spermatozoa without CSP and the epididymal spermatozoa with 100% CSP at 0, respectively (P<0.05). The highest (19.37%) and the lowest (9.38%) viability were related to the epididymal spermatozoa with 0 and 100% CSP at 6, respectively (P<0.05). Under the conditions of the current study, the addition of CSP to the ram epididymal and coated spermatozoa strengthened the detrimental effect of the freezing procedure.