Salmonella enterica serovar Enteritidis live vaccine strain in the reproductive organs of laying goose after subcutaneous vaccination

اين مطالعه با استفاده از تكنيك واكنش زنجيره‌اي پليمراز، زمان واقعي (real time PCR) اختصاصي سرووار سالمونلا انتريتيديس جهت شناسايي DNA ژنومي آن در غازهاي تخمگذار پس از انجام واكسيناسيون زير جلدي در زمان‌هاي مختلف انجام گرفت. جهت افزايش اعتبار نتايج، از روش فلوئورسنت آنتي‌بادي غير مستقيم و ايمنوهيستوشيمي استفاده گرديد. نتايج نشان داد كه سالمونلا انتريتيديس به طور ثابتي در همه نمونه‌ها وجود دارد. واژن و رحم در زمان 20 ساعت پس از واكسيناسيون مثبت بودند و آخرين اندامي كه يك نتيجه مثبت نشان داد، بزرگترين فوليكول قبل از تخمگذاري در زمان 32 ساعت پس از واكسيناسيون بود. تعداد كپي DNA سالمونلا انتريتيديس در هر بافت در فاصله 30 تا 60 ساعت پس از واكسيناسيون به حد بالايي مي‌رسيد به نحوي كه واژن و رحم داراي غلظت بالاتري نسبت به ساير بافت‌ها بودند. با اين وجود تعداد باكتري‌ها در فاصله 3، 4 و 6 روز شروع به كاهش كرد و غلظت DNA سالمونلا انتريتيديس در بافت‌ها به جز واژن پايين‌تر از حد تشخيص رسيد. آزمايش واكنش زنجيره‌اي پليمراز زمان واقعي، در يك سري از بافت‌ها براي بررسي بيشتر مكانيسم محافظت واكسن و بهينه كردن روش واكسيناسيون از نظر كاربرد داراي اهميت فراوان مي‌باشد.

Serovar-specific real-time PCR for Salmonella enterica serovar Enteritidis (S. Enteritidis) was conducted to detect the genomic DNA of S. Enteritidis from laying goose after subcutaneous vaccination at different time points. Indirect fluorescent antibody (IFA) technique and immunohistochemical localization were employed to validate the results. The results showed that S. Enteritidis was consistently detected in all the samples. Vagina and uterus were positive at 20 h PI, and the last organ to show a positive result was the largest and third largest preovulatory follicle, at 32 h PI. The copy numbers of S. Enteritidis DNA in each tissue reached a peak at 36-60 h PI, with the vagina and uterus containing higher concentrations than other tissues. However, the number of bacteria started decreasing by 3-4 d, and by 6 d, the concentration of S. Enteritidis DNA was below the detection limits of the PCR assay, except the vagina. The real-time PCR analysis of a variety of tissues is significant for further investigation of the mechanism of vaccine protection and the optimization of vaccination regimes.