Author/Authors :
Habibi، Maziar نويسنده Department of Biotechnology and plant breeding, Faculty of Agriculture, Ferdowsi University of Mashhad, Mashhad, Iran , , Malekzadeh-Shafaroudi، Saeid نويسنده Department of Biotechnology and plant breeding, Faculty of Agriculture, Ferdowsi University of Mashhad, Mashhad, Iran , , Marashi، Hassan نويسنده Department of Biotechnology and plant breeding, Faculty of Agriculture, Ferdowsi University of Mashhad, Mashhad, Iran , , Moshtaghi، Nasrin نويسنده , , Nassiri، Mohammadreza نويسنده Department of Animal Science, Faculty of Agriculture, Ferdowsi University of Mashhad, Mashhad, Iran , , Zibaee، Saeid نويسنده Razi Vaccine and Serum Research Institute, Mashhad, Iran ,
Abstract :
بيماري تب برفكي يك بيماري خطرناك دامي است كه باعث ايجاد خسارات زيادي به توليد شير و گوشت مي‌شود. بنابراين، توليد يك واكسن زيرواحدي عليه اين بيماري از اهميت بالايي برخوردار است. بيان موقت ژن ابزار ارزشمندي جهت توليد سريع و قابل قبول واكسن‌هاي نوتركيب است. در اين مقاله از بيان موقت ژن با استفاده از اگروباكتريوم در گياه اسفناج جهت بيان يك ژن شيمري استفاده شده است كه بخشي از پروتيين پوششي ويروس مولد تب برفكي موسوم به VP1 را كد مي‌كند. حضور و بيان ژن خارجي در برگ‌هاي استفناج با استفاده از آزمون‌هاي PCR، Real Time PCR، دات بلات و الايزا تاييد شد. نتايج بدست آمده نشان داد كه ژن مورد نظر در سطح بالايي در برگ‌هاي اسفناج بيان شده است و اين نشان مي‌دهد كه بيان موقت روشي موثر و سريع براي توليد پروتيين‌هاي نوتركيب است. مراحل تراريخته‌سازي، تشخيص پروتيين نوتركيب و كاربرد آن در آزمايشات مولكولي توضيح داده مي‌شود
Abstract :
Foot and Mouth Disease (FMD) is a very dangerous livestock disease which causes a serious loss in the
production of milk and meat. Therefore, producing an effective recombinant subunit vaccine virus this
disease is of great importance. Transient gene expression is a valuable tool to reach rapid and acceptable
recombinant vaccine. An Agrobacterium-mediated transient gene expression assay was carried out in
spinach (Spinacia oleracea) leaves for expression of a chimeric gene encoding a part of capsid protein of
Foot and Mouth Disease virus called VP1. The plant leaves were transformed via agroinfiltration
procedure. The presence of foreign gene and its expression in transformed plants were confirmed through
polymerase chain reaction (PCR), real time PCR, protein Dot blot and ELISA. The results obtained in this
examination showed quite a high level of gene expression in spinach leaves, showing that transient gene
expression can be applied as an effective and time-saving procedure for the production of recombinant
proteins. The procedures for transformation, detection of recombinant protein and its application for
molecular experiments are described in the study
