توليد پادتن IgY بر ضد هليكوباكتر پيلوري در بلدرچين

هليكوباكتر پيلوري يك باكتري گرم منفي و ميكرو آئروفيليك است كه به عنوان عامل عفونت معده در بيش از نيمي از مردم جهان شناخته مي‌شود. در اين مطالعه، توليد پادتن زرده (IgY) ضد هليكوباكتر پيلوري در بلدرچين و ارزيابي تاثير روش‌هاي مختلف ايمن سازي بر عيار آنتي بادي توليد شده در زرده تخم‌ها مورد بررسي قرار گرفت. جهت ايمن سازي از پادگن توليد شده از باكتري كامل استفاده شد. چهل بلدرچين ژاپني (Coturnix japonica) انتخاب و به چهار گروه تقسيم شدند. به گروه اول يك دوز كامل از پادگن (108 × 3 باكتري غير فعال شده) به صورت داخل عضلاني تزريق شد، در حاليكه گروه دوم نيمي از اين دوز و گروه سوم نيز يك دوز كامل را به صورت خوراكي دريافت كردند. IgY از تخم بلدرچين با روش ترسيبي و با استفاده از آب و كلروفرم جداسازي شد. از آزمون‌هاي سرم شناسي دات بلات و الايزا جهت تعيين حضور و سنجش عيار پادتن IgY در زرده‌ها استفاده شد. نتايج اين مطالعه نشان داد كه بلدرچين همانند مرغ قادر به توليد IgY ضد هليكوباكتر پيلوري است. پادتن توليد شده در بلدرچين عيار و ويژگي بالايي داشته و مي‌تواند براي اهداف درماني و تحقيقاتي مورد استفاده قرار گيرد. به علاوه نتايج اين تحقيق نشان مي‌دهد كه ميزان بالاتري از پادگن، قادر به توليد عيار بالاتري از پادتن نمي‌شود و در بلدرچين براي ايجاد پاسخ ايمني كارآمد در برابر هليكوباكتر پيلوري، روش تزريقي ضروري نيست.

Helicobacter pylori (H. pylori) is a gramnegative, microaerophilic bacterium that cause the stomach infection in more than 50% of human population worldwide. The aim of this study was to examine the possibility of antiH. pylori immunoglobulins Y (IgYs) production in quails and evaluate the effect of the different methods of immunization on titers of IgY in egg yolks. Whole cell bacterial antigen was used for immunization of quails. Forty Japanese quails (Coturnix japonica) were divided into four groups. The first group intramuscularly immunized with one dose of antigen (3 × 10^8 inactivated bacteria) whereas the second group injected with half dose. Third group administered orally. Yolk IgY was isolated using precipitation method of water dilution combined with chloroform. Dotblot and ELISA (enzymelinked immunosorbent assay) were used for determining the specificity and quantifying the titer of IgY in egg yolks. Results showed that quails as well as chickens are able to produce antiH. pylori IgY. Quails antibodies have high titer and specificity that can be used in therapeutic and research purposes. This study indicated that higher amounts of antigen can not develop higher titer of IgY and injection is not necessary for efficient immunization of the quail against H. pylori.