ارزيابي اسپرم‌هاي منجمد/آب شده از ناحيه دم اپيديديم و پتانسيل بارورسازي اسپرم گاوي جمع‌آوري شده از دم اپيديديم

در مطالعه حاضر، پتانسيل بارورسازي مايع مني جمع‌آوري شده از اپيديديم گاوهاي نر كشتار شده بعد از انجماد به وسيله تكنيك‌هاي قراردادي و روش هاي فلوسيتومتري مورد بررسي قرار گرفت. دم اپيديديم برش داده شد، و اسپرم‌ها جمع‌آوري شده و از نظر حجم، غلظت اسپرم و انسجام آكروزوم و غشا با استفاده از يك فلوسيتومتر ارزيابي شدند. پتانسيل بارورسازي اسپرم به وسيله لقاح داخل آزمايشگاهي (IVF) مورد آزمايش قرار گرفت. قبل از فريز كردن، غلظت متوسط اسپرم sperm/ml 106 × 5/27 ± 216 بود. زنده ماني اسپرم به طور متوسط 4% ± 5/86 بود. درصد متوسط اسپرم با آكروزوم و غشاي پلاسمايي سالم قبل و بعد از انجماد به ترتيب 9/2% ± 7/90 و 9/1% ± 8/90 (P≥0.05) بود. متوسط ميزان بارورسازي، با استفاده از مايع مني منجمد/آب شده ناحيه اپيديديم 9/3% ± 1/64 بارورسازي بدون اختلاف معني‌دار (P>0.05) ميان گاوها به دست آمد. در رابطه با گاوهاي منظور شده به عنوان گروه كنترل، ميزان بارورسازي 5/4% ± 2/72 بود، كه به طور معني‌داري با ميزان بارورسازي مايع مني منجمد/آب شده اپيديديمي اختلاف داشت (P>0.05). در نتيجه، امكان بهره‌گيري از تكنيك‌هاي آزمايشگاهي با اسپرماتوزوآهاي منجمد جمع‌آوري شده از اپيديديم گاوها با استفاده از روش انجماد با سرعت تحت كنترل به همراه نمودار انجماد از قبل تعيين شده، و همراه با ارزيابي زنده ماني اسپرم با تكنيك‌هاي معمول و روش‌هاي فلوسيتومتري، با قابليت بارورسازي اسپرماتوزوآهاي اپيديديمي منجمد وجود دارد.

In the present study, the fertilizing potential of semen recovered from slaughtered bulls epididymis was evaluated after cryopreservation, by conventional techniques and flow cytometry methods. The cauda epididymal was dissected and sperm were recovered and evaluated for volume, sperm concentration, and membrane and acrosome integrity using a flow cytometer. Sperm fertility potential was tested by in vitro fertilization (IVF). For each bull, three trials of IVF were performed. Before freezing, on average, the sperm concentration was 216 ± 27.5 × 106 sperm/ml. Sperm viability averaged 86.5 ± 4%. The mean percentage of sperm with intact plasma membrane and acrosome before and after cryopreservation was 90.7 ± 2.9% and 90.8 ± 1.9% (P≥0.05), respectively. The fertilization rate using frozen/thawed epididymal semen averaged 64.1 ± 3.9% fertilization with no significant differences between bulls (P>0.05). For the bull considered as control, the fertilization rate was 72.2 ± 4.5%, differing significantly (P>0.05) from the frozen/thawed epididymal semen’s fertilization rate. In conclusion, it is possible to use in vitro techniques with cryopreserved spermatozoa obtained from bull’s epididymis using a controlled rate freezing method with a predetermined freezing curve, and with assessment of sperm’s viability by conventional techniques and flow cytometry methods, together with the fertilizing ability of cryopreserved epididymal spermatozoa.