اثرات آنتي‌اكسيداني عصاره الكلي مرزنجوش بر روي پارامترهاي كنتيكي، ميكروسكوپيكي و اكسيداتيوي اسپرم‌هاي گاو نر هلشتاين

گياه مرزنجوش داراي سطوح بالايي از تركيبات فنولي نظير اسيد گاليك و فنل­هايي نظير اسيد رزمارينيك و كوئرسيتين است. هدف از مطالعه حاضر بررسي اثرات عصاره مرزنجوش به عنوان آنتي­اكسيدان طبيعي، بر روي كيفيت مني منجمديخ­گشايي شده گاو نر هلشتاين بود. اسپرم­گيري دو بار در هفته، به مدت دو ماه و از سه گاو نر هلشتاين (65 ساله با ميانگين وزني 800 كيلوگرم) انجام گرفت. عصاره اتانولي مرزنجوش در مقادير 20، 16، 12، 8، 4، 2 ميلي­ليتر در دسي­ليتر رقيق­كننده به­رقيق كننده بر پايه سيتراتزرده تخم مرغ افزوده شد. بعد از يخ­گشايي نمونه­هاي مني، پارامترهاي تحركي اسپرم، زنده­ماني و يكپارچگي غشاء به ترتيب توسط سيستم كاسا، رنگ آميزي ائوزيننيگروزين و تست التهاب هيپواسمتيك مورد ارزيابي قرار گرفتند. همچنين مقادير مالون دي آلدهايد و فعاليت سوپراكسيد ديسموتاز و كاتالاز اندازه­گيري شدند. نتايج بيانگر بالا بودن درصد تحرك (98/7±34/72) در نمونه دريافت كننده 4 ميلي­ليتر در دسي­ليتر عصاره مرزنجوش بود (05/0>P). افزودن 2 و 4 ميلي­ليتر در دسي­ليتر عصاره مرزنجوش باعث بهبود معني­دار ميزان تحرك، يكپارچگي غشاء پلاسمايي اسپرم­ها بعد از فرآيند انجماديخ­گشايي نسبت به گروه شاهد شد. افزودن 4 ميلي­ليتر در دسي­ليتر عصاره مرزنجوش باعث كاهش غلظت مالون دي آلدهايد نسبت به گروه شاهد شد (05/0>P). ميزان فعاليت سوپراكسيد ديسموتاز و كاتالاز در نمونه­هاي دريافت كننده 8 و 4 ميلي­ليتر در دسي­ليتر عصاره مرزنجوش به طور معني­داري افزايش يافت (به ترتيب 18/0±86/1 و 28/0±92/1 واحد بر ميلي­گرم پروتئين؛ 13/0±54/4 و 28/0±28/4 واحد بر ميلي­گرم پروتئين) (05/0>P). ميزان فعاليت سوپراكسيد ديسموتاز و كاتالاز به طور معني­داري در نمونه­هاي دريافت كننده 4 و 8 ميلي­ليتر در دسي­ليتر عصاره مرزنجوش افزايش يافت (05/0>P). به طور كلي، افزودن 2 و 4 ميلي­ليتر در دسي­ليتر عصاره مرزنجوش به رقيق­كننده مني باعث بهبود كيفيت مني بعد از انجماديخ­گشايي ­شد كه ممكن است به دليل افزايش فعاليت آنزيم­هاي آنتي­اكسيداني و كاهش پراكسيداسيون ليپيدي باشد.

Origanum vulgare contains high levels of phenolic compounds such as gallic acid and polyphenols such as rosmarinic acid and quercetin. The purpose of this study was to investigate the effects of Origanum vulgare extract, as a natural antioxidant, on freezing-thawing semen quality in Holstein bulls. Three Holstein bulls (5-6 years old, mean live weight 800 kg) were used for semen collection twice a week for two months. Ethanol extract of Origanum vulgare (2, 4, 8, 12, 16 and 20 mL/dL extender) was added to a citrate-yolk-base extender. After freezing-thawing sperm motility parameters, viability and membrane integrity were determined using a CASA system, eosin-nigrosin staining, and hypo-osmotic swelling test, respectively; malondialdehyde concentration and activity of superoxide dismutase and catalase were also measured. The percentages of motility were higher (P<0.05) in the freezing extender containing 4 mL/dL Origanum vulgare extract (72.34±7.98). Addition of 2 and 4 mL/dL extract of Origanum vulgare significantly improved the motility, viability and plasma membrane integrity of the spermatozoa following freezing-thawing process compared to the control group. Addition of 4 mL/dL extract significantly reduced the concentration of malondialdehyde compared to the control group (P<0.05). The activity of superoxide dismutase and catalase increased significantly by inclusion of 4 and 8 mL/dL extract of Origanum vulgare to the extender (1.86±0.18 and 1.92±0.28 U/mg protein; 4.54±0.13 and 4.28±0.28 U/mg protein, respectively). The activity of superoxide dismutase and catalase was significantly increased by inclusion of 4 and 8 mL/dL extract to the extender. In conclusion, addition of 2 and 4 mL/dL extract of Origanum vulgare to the semen extender improved the post-thawed quality of semen, which may be due to increasing in antioxidant enzyme activity and reduction in lipid peroxidation.