موقعيت‌يابي گرلين در بيضه گاو

گرلين، پپتيد 28 اسيد آمينه آسيله شده، به ‌عنوان ليگاند اندوژنوسي براي گيرنده ترشحي هورمون رشد (GH) و نقش آن در توليد­ مثل كه اخيراً منتشر شده شناسايي شده است. عقيده بر اين است كه محل بيان گرلين در بيضه‌ها ممكن است نقش آن را در تنظيم موضعي نشان دهد. در اين مطالعه موقعيت‌يابي ايمنوهيستوشيمي (IHC) گرلين در بافت بيضه گاو هلشتاين با استفاده از آنتي‌بادي مونوكلونال ضد گرلين به ‌عنوان آنتي‎بادي اوليه و آنتي‎بادي پلي‌كلونال دانكي ضد IgG خرگوشي گونژوگه شده با هورس راديش پراكسيداز (HRP) به‌ عنوان آنتي‌بادي ثانويه انجام گرفت. نمونه‌هاي بيضه از سه گاو هلشتاين 25/1 ساله جمع‌آوري شدند و جهت قرار گرفتن در پارافين در مرحله بعدي در فرمالين 10 درصد نگهداري شدند. مقاطع بافتي با ضخامت 5 ميكرون براي آزمايش IHC تهيه شد. واكنش‌هاي ايمني براي سلول‎هاي اسپرماتوژنيك و سلول‎هاي لايديگ و سرتولي ارزيابي شدند. عقيده بر اين است كه محل بيان گرلين در مراحل اسپرماتوژنز، سلول‌هاي لايديگ و سرتولي ممكن است نقش آن را در تنظيم موضعي نشان دهد. اين يكي از اولين تحقيقاتي است كه شواهد مولكولي را براي وجود گرلين در سلول‎هاي بافت بيضه گاو هلشتاين فراهم مي‌كند.

Ghrelin, a 28-amino acid acylated peptide, was identified as the endogenous ligand for the growth hormone (GH) secretagogue receptor and its role in reproduction has recently been established. It is believed that the site of ghrelin expression in testes may indicate its role in local regulation. This study investigated the immunohistochemical (IHC) localization of ghrelin in Holstein bull testis using a monoclonal anti-ghrelin antibody as primary antibody and donkey anti-rabbit IgG horseradish peroxidase (HRP) polyclonal anti-body as secondary antibody. Samples of testis were collected from three Holstein bulls aged of 1.5 to 2 years old and preserved in 10% formalin for posterior inclusion in paraffin. Histological sections with 5 micron in thickness were prepared for IHC. Immunoreactions were assessed for spermatogenic cells and leydig and sertoli cells. It is believed that the site of ghrelin expression in the spermatogenesis process, leydig and sertoli cells, may indicate its role in local regulations. This is one of the first studies to provide molecular evidence for the presence of ghrelin within testicular tissue cells of Holstein bulls.