Troxerutin protect sperm, seminiferous epithelium and pituitary-gonadal axis from torsion-detorsion injury: An experimental study

مقدمه: تروکسریوتین یک ترکیب آنتی­اکسیدانی است که قادر است بافت­های مختلف را در برابر آسیب­های ناشی از ایسکمی-ریپرفیوژن محافظت کند. هدف: هدف این مطالعه بررسی اثر تروکسریوتین در کاهش آسیب ناشی از ایسکمی-ریپرفیوژن بیضه در موش­های صحرایی نر بالغ است . موارد و روش­ها: در این مطالعه از 40 موش نر استفاده شد. موش­های صحرایی به 4 گروه 10 تایی  تقسیم شدند و در خانه حیوانات در شرایط مناسب با درجه حرارت کنترل شده oC 2±22، دوره نوری 12 ساعت روشنائی 12 ساعت تاریکی و دسترسی آزاد به آب و غذا نگهداری شدند. گروه اول یا گروه شم: این گروه به جز آب و غذا ترکیب دیگری دریافت نکردند. گروه دوم: گروه کنترل که تحت ایسکمی-ریپرفیوژن بودند. گروه سوم: گروه ایسکمی-ریپرفیوژنmg/kg  150 تروکسریوتین دریافت کردند. گروه چهارم: گروه ایسکمی-ریپرفیوژن، mg/kg 20 ویتامین C به صورت گاواژ دریافت کردند. در گروه سوم و چهارم بیضه­ها به میزان ۷۲۰ درجه و به مدت ۹۰ دقیقه چرخیده و سپس به مدت ۵۰ روز خونرسانی مجدد برقرار گردید. بعد از ۵۰ روز پس از خونگیری، موش­ها کشته و بیضه­ها خارج و در محلول بوئن فیکس گردید. مقاطع بیضه به روش هماتوکسیلین و ائوزین رنگ­آمیزی شدند. میزان هورمون LH،FSH ، تستوسترون با روش ELISEA سنجش شد. برای نشان دادن آپوپتوز از روش تانل استفاده گردید. از قسمت دم اپیدیدیم برای شمارش اسپرم استفاده گردید. از تکنیک جانسون برای بررسی لوله­های سمینی فروس استفاده شد. نتایج: میزان تغییرات بافتی لوله­های سمی نیفروس، تعداد و درصد زنده ماندن اسپرم، میزان هورمون LH،FSH ، تستوسترون و میزان آپوپتوز در گروه­های مورد مطالعه (کنترل، دریافت­کننده تروکسریوتین، ویتامین C و کنترل سالم) از لحاظ آماری معنی­دار بود. تروکسریوتین باعث بهبود روند تغییرات ایجاد شده در لوله­های سمی نیفروس بیضه موش­های تورشن/دتورشن شده از طریق افزایش نمره جانسون و کاهش تعداد سلول­های زایای آپوپتوزی نسبت به گروه کنترل می­شود و همچنین باعث افزایش میزان سطوح سرمی هورمون­های LH و تستوسترون و عدم تغییر معنی­دار هورمون FSH نسبت به گروه ایسکی ریپرفیوژن بدون دریافت دارو می­شود. نتیجه­گیری: تروکسریوتین دارای اثرات محافظتی بر لوله­های سمی نیفروس متعاقب تورشن-دتورشن بیضه است.

Background: Troxerutin is a flavonoid antioxidant that protect different organ against damage caused by ischemia-reperfusion. Objective: The aim of this study was to evaluate the effect of troxerutin in reducing the damages caused by ischemia-reperfusion in ratʹs testis. Materials and Methods: 40 Male Wistar rats (2 month old) were divide to four groups (n=10). Group1 (sham), Group 2 (control, ischemia-reperfusion (I/R) without treatment), Group 3 (I/R+150 mg/kg of troxerutin), and group 4 (I/R+20 mg/kg of vitamin C). Treatment of group 3 and group 4 during torsion (twists 720 counter clock at 90 min) followed by 50 days detorsion. After 50 days, blood samples were collected and rats in all study groups were killed and their testes were removed, and fixed with Bouin’s solution. Testis was stained with hematoxylin and eosin dye and the level of testosterone, luteinizing hormone (LH) and follicle-stimulating hormone (FSH) were measured with ELISEA methods. TUNEL was employed to detect apoptosis. Epididymis caudal part was removed and total sperm count was determined. Johnson techniques were used for assessment of seminiferous tubules quality. Results: Troxerutin treated group has higher Johnson score’s (p≤0.001), antiapoptotic properties (p≤0.001), sperm count (p=0.065), and higher LH (p≤0.001), FSH (p≤0.001) and testosterone (p=0.002) levels than control group. Vitamin C treated group showed increase level of testosterone but didn’t show significant differences on the number of apoptotic cells, Johnson scores, LH, FSH and sperm count than control group. Conclusion: Troxerutin has protective effects on testicular torsion induced injury and can ameliorate spermatogenesis in the torsion-detorsion models.