Other language title :
تركيب Cry۱Ac و Cry۲A براي ايجاد مقاومت عليه Helicoverpa armigera در پنبه
Title of article :
Combination of Cry1Ac and Cry2A to Produce Resistance against Helicoverpa armigera in Cotton
Author/Authors :
Bajwa, K.S Center of Excellence in Molecular Biology - University of the Punjab - Lahore, Pakistan , Azam Ali, M Center of Excellence in Molecular Biology - University of the Punjab - Lahore, Pakistan , Rao, A. Q Center of Excellence in Molecular Biology - University of the Punjab - Lahore, Pakistan , Shahid, A.A Center of Excellence in Molecular Biology - University of the Punjab - Lahore, Pakistan , Husnain, T Center of Excellence in Molecular Biology - University of the Punjab - Lahore, Pakistan
Abstract :
Genetic manipulation to get desirable characters in cash crops like cotton remains the
prime objective of crop biotechnology. To produce transgenic plants resistant against
bollworms, newly emerged embryos of MNH-786 cotton variety were transformed with
Agrobacterium tumefaciens strain LBA4404 harboring the plasmid pKHG4 vector
containing Cry1Ac+Cry2A genes under the control of CaMV35S promoter. The
integration and expression of these genes were evaluated by PCR, Florescent In-Situ
Hybridization (FISH), and ELISA, respectively. Out of 700 putative transgenic cotton
plants, 10 plants (1.03% transformation efficiency) showed the presence of genes
Cry1Ac+Cry2A through PCR analysis. In vitro, insect feeding bioassay was done for
estimation of mortality percentage of Helicoverpa armigera. Insect mortality rate and
morphological characteristics of Bt cotton were analyzed by phenotypic correlation, path
coefficient regression and covariance to evaluate the advantage of transgenic technology
in numerical terms. Statistical analysis indicated significant positive correlation between
insect mortality and cotton seed yield. Helicoverpa armigera mortality data produced a
directly proportional relation with cotton seed yield. The results of this study support the
improvement of cotton defense mechanism against insects and natural competitors
through genetic modification.
Farsi abstract :
دستكاري ژنتيكي براي ايجاد ويژگي هاي مطلوب در گياهان پر فروش منجمله پنبه همچنان هدف اصلي بيوتكنولوژي (زيست فناوري) گياهان است. براي توليد گياهان تراريخته مقاوم عليه كرم غوزه (bollworm)، نطفه هاي تازه رقمMNH-786 پنبه با اگروباكتريوم تومفاسينس با سويه LBA4404 با پلاسميد pKHG4 ناقل ژن هاي Cry1Ac+Cry2A تحت كنترل CaMV35S راه انداز(promoter) تراريخته شد. براي ارزيابي يكپارچگي و بيان اين ژن ها، به ترتيب ازPCR، دورگه سازي درجاي فلورسنتي(FISH)، وELISA استفاده شد. در ميان 700 بوته پنبه فرضا (putative) تراريخته، 10 بوته (1/03 % راندمان تراريختي) حضور ژن هاي Cry1Ac+Cry2A را با روش تحليل PCR نشان دادند.در آزمون درون شيشه، زيست آزمون تغذيه حشرات براي برآورد (mortality percentage) درصد ميرندگي Helicoverpa armigera به كار رفت. نرخ ميرندگي حشرات و ويژگي هاي مورفولوژيكي پنبه Bt با همبستگي فنوتيپي، رگرسيون ضريب مسير، و كوواريانس تحليل و تجزيه شد تا بتوان فوايد فناوري تراريختي را به صورت عددي برآورد كرد. تحليل آماري به همبستگي مثبت معناداري بين ميرندگي حشرات و عملكرد پنبه دانه اشاره داشت. داده هاي مرگ و مير Helicoverpa armigera يك رابطه مستقيم و متناسب با عملكرد پنبه دانه به دست داد. از نتايج اين آزمايش چنين برميآيد كه با تغييرات ژنتيكي مي توان سازو كار دفاعي پنبه را برعليه حشرات و رقباي طبيعي بهبود بخشيد.
Keywords :
Transgenic cotton , Insect mortality , Bollworms
Journal title :
Journal of Agricultural Science and Technology (JAST)