استخدام تقنية Multiplex PCRلتشخيص بعض جينات الضراوة لبكتريا Klebsiella sp. المعزولة من مواقع بيئية مختلفة.

تضمنت الدراسة جمع 399عينة من بيئات مختلفة والتي شملت السريرية والغير سريرية حيث جمعت 293عينة سريرية(ادرار، جروح،حروق، خروج، قشع) اما الغيرسريرية (التربة والمياه) فقد كان مجموعها106 عينة خلال الفترة من تشرين الثاني 2014 ولغاية شباط 2015.تـم تشخيص 51 عزلة بكـتيرية تعــود الــى بكتريـــا K. pneumoniaeباستخدام طرق التشخيص المــظهرية والــزرعية والكيموحيوية وتم تاكيد التشخيص باستخدام API20E وباستخدام جهازالفايتكvaitek2 .اظهرت نتائج اخـتبار مقاومــة الـمضادات للعينات الــمعزولة مـن الحالات المرضية المختلفة والمصادرالبيئية (التربة،المياه) لـ12 من المضادات الحياتية مـن مختـلف الـمجاميع تباينا فيما بينها بين مقاومة وحساسة لهذه المضادات بينما كانت البكتريا حساسة وبنسبة100% فقط للمضاد الحيوي Imipenem.صممت عـدد مـن الــبادئات المتخصصة للــكشف عــن البكتريا بــاستخدام جين مميز فيها والكشف ايضا عن مقاومتها للمضادات باستخدام تقنية تفاعــل البلمرة الــتسـلـسلـي الـمتعدد Multiplex PCR للكشف عن وجود او غياب ثمانية انواع مــن الجينات magA, rmpA ,htrA ,Uge-1 ,gent-2, blaCTX ,terA-, StrA-2 المشفرة لعوامل الضراوة الرئيسية لتشخيص K. pneumoniae.واظهرت النتائج وجود تباين في المحتوى الجيني بين العزلات فقد احتوت 45عزلة بكتيرية على الجين rmpA والذي يمكن ان يتخذ كموشرتشخيصي وفي نفس التفاعل تم الكشف عــن وجودجينات مــقاومة لاربعة مــن المضادات الحياتية العائدة الـــى مجاميع مختلفة (StrA, terA ,blaCTX, gent-2) حيث احتوت كل عزلاتK.pneumoniae علــى جين StrA. ومــن خلال هـــــذه الدراسة يمكن استثمار تقنية البلمرة التسلسلية المتعددة كوسيلة لــتمييز الــبكتريا الــمعزولة مــن مــصادرمـختلفة بصورة دقيقة وتشخيص مقاومتها للمضادات الحياتية الشائعة الاستعمال بوقت قصير وجهد اقل دون الرجوع الى الفحوصات الروتينية المعروفة.