Title of article :
دراسة وراثية للطوافر البكتيرية المحللة للمركبات الفينولية
Author/Authors :
الياس, ميساء جاسب جامعة النهرين - كلية العلوم - قسم التقانة الاحيائية, العراق , حامد, دانية منعم جامعة النهرين - كلية العلوم - قسم التقانة الاحيائية, العراق , حمزة, صبحي جواد جامعة بغداد - كلية العلوم - قسم التقانة الاحيائية, العراق
Abstract :
في هذه الدراسة تم عزل 30 عزله بكتيريه من 55 عينة تربة و 10 عينات مياه ملوثة بالمخلفات النفطية وتم التحري عن
قابليتها لتحلل الفينول و الاتلين وتم اختياره عزلات اعتمادا على قابليتها على التفكيك لهذه المركبات وشخصت العزلات على انها Pseudomonas aeruginosa ورمز لها A13 A5 و Escherichia coli ورمز لها
A11 ،A2
و Enterobacter cloacae ورمز لها A8. ولغرض زيادة نسبة تحلل هذه البكتريا الفينول والاتلين تم الحصول على عدد من الخلايا الطافرة باستعمال المطفر الكيمياوي النايتروزوكوانيدين بتركيز 500 مايكروغرام/ مليليتر بمدد زمنية مختلفة (
100،000
، 200) ساعة وبينت النتائج أن المدة ساعة واحدة كافيه لاستحثاث الطفرات في البكتريا قيد الدراسة وزادت نسبة التحلل وبلغت (90، 90، 97)% الفينول للعزلات (A8 و A13 وA11) على التوالي عند التركيز 2000 مايكروغرام/ مليليتر الفينول، وبلغت (90، 97، 100)% للانلين عند التركيز 2500 مايكروغرام/ مليليتر. اكدت نتائج الترحيل الكهربائي في هلام الاكاروز امتلاك العزلات (
A13 ،A8
) ثلاث حزم بلازميدية وامتلاك العزلات (A15، A11) حزمتين بلازميدية.
كما تناولت الدراسة إجراء تحييد لبلازميدات العزلات (A8 و A13 وA11) لتحديد العوامل الوراثية المسؤولة عن تحلل الفينول والاتلين باستخدام الصبغات الاكردن البرتقالي وبروميد الاثيديوم و مادة (SDS) وبينت النتائج الحصول على خلايا محيدة للعزلتين ( A13c ،A110
) بأستخدام 2200 مايكروغرام/ مليليتر من مادة SDS و 200 مايكروغرام/ مليليتر من صبغة الاكردين البرتقالي وفشلت جميع المحاولات في الحصول على خلايا محيدة للعزله (A8c) فاقدة لقدرتها على تحلل المركبات الفينولية، اجريت محاولات لتحويل سلاله البكتريا
E. coli MM294 بالدنا البلازميدي المستخلص من العزلات (A11، A8،A13 ). اذ أظهرت نتائج التحول قدرة نمو البكتريا
E. coli MM294 على الأوساط الحاوية على الفينول والاتلين كل على حده مما يؤكد الموقع البلازميدي لتلك الجينات.
Other languages abstract :
were obtained from 55 soil`s sample and 10 bacterial isolates were obtained from water sample that contaminated with oil derivatives. These isolates were submitted to phenol and analine degradation. Five isolates were selected depending on their ability to degraded these compounds and identified as Pseudomonas aeruginosa A5، A13 and Escherichia coli A2، A11 and Enterobacter cloacae A8. In order to increase the degradation percentage a number of mutant cells were obtained using 500 mg/ml of N-methy –N-nitro-N- nitrosoguanidine (NTG) at different periods (0.5،1.0 and 2.0) hours. The percentage of degradation were increased to, 90,90,97% for phenol by (a11، a13 and a8) and to 90,97,100% for analine at 2500 mg/ml. The result of gel electrophoresis indicated that A13, A8 and A8 contain three plasmid bands whereas A11, a13 and a11 contain only two. In order to determine the genetic factors which responsible for degradation of phenol and analine، curing of plasmid were applied to A8, A13 and A11 using acridine orange، ethidium bromide and Sodium dodecyl sulfate (SDS) as curing agent. Result indicated that using 2200 mg/ml of SDS and 200 mg/ml of acridine orange two curing cells for A13c، A11c mutant isolates were obtained while A8M12 failed to obtained curing cells due to the losing of their ability for degradation phenolic compounds. Further more، Plasmid DNA of (A11,A13,A8) bacterial isolates were transformed to bacterial strain E. coli MM294 bacterial strain. the ability of E. coli MM294 to grow on phenol and analine culture media may indicate that the genes responsible for degradation of these compounds were located on plasmid DNA.
Keywords :
لطوافر البكتيرية , دراسة وراثية , مركبات الفينولية
Journal title :
Al-Nahrain Journal Of Science
Journal title :
Al-Nahrain Journal Of Science
