التنميط الجيني لجين ABO في عينة سكانية عراقية باستعمال تقانة PCR-RFLP

هدفت الدراسة الى الكشف الجزيئي لجين مجاميع الدم ABO والتعرف على انماط الاليلات ABO في عينة سكانية عراقية. اشتملت الدراسة على 100 شخصاً من الاصحاء, تم الحصول على العينات من مركز بحوث التقنيات الاحيائية في جامعة النهرين بمدينة بغداد, والعينة عبارة عن دم كامل وتم استعمال جزء من الدم الكامل في الكشف عن مجموعة الدم باستعمال الطريقة السريرية التي تعتمد على تفاعل الضد والمستضد والجزء الآخر للتنميط الجزيئي باستعمال تقانة PCR-RFLP. ضوعفت قطعتان من جين ABO الواقع على كروموسوم 9, تقع القطعة الاولى في الاكسون 6 وتتضمن النيوكليوتيدة 261 والقطعة الثانية في الاكسون 7 والمتضمنة النيوكليوتيدة 703 ( يتكون جين ABO من 6 انترونات و 7 اكسونات), نتج من مضاعفة القطعة الاولى 468 زوج قاعدة, في حين نتج من مضاعفة القطعة الثانية 298 زوج قاعدة. رُحلَت نواتج تفاعل PCR على 2% هلام الاكاروز. تميز النيوكليوتيدات 261,703 اليلات مجاميع الدم A, B, O بواسطة انزيمات التقييد, وفي هذه الدراسة استعملت اثنان من انزيمات التقييد الاول Kpn1 والذي يحدد الحذف الموجود في قاعدة الكوانين ضمن النيوكليوتيدة 261ويحدد الانزيم الثاني Alu1الاستبدال الموجود في قاعدة الكوانين الى الادنين ضمن النيوكليوتيدة 703. رُحِل ناتج عمليات الهضم بهذه الانزيمات على 2% من هلام الاكاروز لمشاهدة القطع الناتجة, قورنت جميع القطع مع الدليل الحجمي وحُددَت احجامها. اظهرت نتائج تقانة PCR-RFLP ان من بين 28 نموذج ذوو مجموعة الدم A كان 23(23.9782%) نموذج ذوو طرز وراثية هجينة AO و5(4.0218%) نماذج ذوو طرز وراثية متجانسة AA, بينما كان من بين 26 نموذج ذوو مجموعة الدم B 24(22.6809%) منهم ذوو طرز وراثية هجينة BO و 2(3.3191%) منهم ذوو طراز وراثي متجانس BB و 38(38%) ذوو طراز وراثي OO و 8(8%) ذوو طراز وراثي AB. اظهرت الدراسة وجود اليل O2, كما اوضحت الدراسة انه لا يوجد اي اختلاف عند مقارنة النمط المظهري بالنمط الجيني.