طراحي و ساخت سازه ژني كدكننده فاكتوررشد فيبروبلاستي 2 متصل به بخش ايمونوداميننت توكسين سودوموناس آئروژينوزا

چكيده زمينه و هدف: توقف رگ زايي تومور، رشد سلول‌هاي توموري را به طور قابل ملاحظه اي كاهش مي‌دهد. در اين ميان پروتئين فاكتور رشد فيبروبلاست 2 (bFGF) به ‌عنوان يك فاكتور رگ زايي مهم هدف مناسبي در مهار رگ زايي تومور و درمان سرطان است. هدف اين مطالعه طراحي، ارزيابي و ساخت سازه ژني نوتركيب در جهت بيان كارامد فيوژن پروتئيني است كه داراي بخش هاي ايمونوداميننت توكسين سودوموناس همراه با bFGF است. روش بررسي: چگونگي حضور لينكرهاي مختلف، بهينه‌سازي كدون هاي كد كننده اسيدهاي آمينه و افزودن توالي سيگنال جهت افزايش ايمونوژنيسيته فيوژن پروتئين از جمله فاكتورهاي مهم بوده كه در اين طراحي لحاظ گرديده است. پس از حصول اطمينان ازكارآمد بودن قطعه طراحي شده، قطعه نوكلئوتيدي كدكننده براي سنتز در وكتور كلونينگ pUC57 سفارش داده شد. سپس قطعه ژني در سايت كلونينگ وكتور بياني pET28 a قرار گرفت. با استفاده از آزمون هاي تكثير ژني و هضم آنزيمي وجود قطعه طراحي شده در وكتور بياني مورد ارزيابي قرار گرفت. يافته ها: بهينه ‌سازي كدون هاي كد كننده سازه ژني منجر به افزايش سازگاري كدون هاي خوانش از 69/0 به 83/0 شد. همچنين ميزان محتوي GC (GC content)پس از بهينه‌سازي از61 به 77/54 كاهش يافت. حضور باند 1214 جفت بازي به روش تكثيرژني و باند 1029 جفت بازي به روش هضم آنزيمي در الگوي الكتروفورز تاييدكننده فرايند صحيح كلونينگ مي‌باشد. نتيجه گيري: براساس مطالعات صورت پذيرفته، اين نخستين مطالعه در خصوص طراحي، ارزيابي و ساخت قطعه كد كننده مربوط به فيوژن پروتئيني است كه واجد قطعات مربوط به دومين هاي ايمونوداميننت فاكتور رشد فيبروبلاست 2 و بخش ايمونوداميننت توكسين سودو است. واژه هاي كليدي: رگ زايي تومور، بخش ايمونوداميننت توكسين سودوموناس ائروژينوزا، فاكتور رشد فيبروبلاست 2، نرم افزار DNA2