Isolation and identification of Mycoplasma agalactiae by culture and Polymerase Chain Reaction in Sheep and Goat Milk Samples in Kordestan province, Iran

بيماري آگالاكسي مسري يكي از معمولترين بيماري ها در نشخواركنندگان كوچك است كه عامل آن مايكوپلاسما آگالاكتيه است. اين بيماري بطور گسترده در جهان وجود دارد و ايران يكي از كشورهاي درگير مي باشد. هدف از اين مطالعه جداسازي و تشخيص مايكوپلاسما آگالاكتيه با روش كشت و واكنش زنجيره‌اي پليمراز در نمونه هاي شير گرفته شده در استان كردستان ، ايران بوده است. 367 نمونه شير از گوسفند و بز جمع آوري گرديد. جهت تست واكنش زنجيره اي پليمراز از پرايمر اختصاصي مايكوپلاسما آگالاكتيه كه قطعه 375 جفت بازي را تكثير مي دهد استفاده گرديد.20 نمونه (5/5%) از 367 نمونه مورد آزمايش در محيط كشت PPLO آگار مثبت بودند و5 نمونه (25%) از 20 نمونه جدا شده با پرايمر مايكوپلاسما آگالاكتيه مثبت گرديدند. از 5 نمونه جدا شده 4 نمونه(75%) مربوط به گوسفند و 1 نمونه(25%) مربوط به بز بود. نتايج تست واكنش زنجيره اي پليمراز بر روي 367 نمونه شير نشان داد كه 11 مورد(3%) با پرايمر مايكوپلاسما آگالاكتيه مثبت مي باشند. جداسازي مايكوپلاسما آگالاكتيه نشان مي دهد كه بيماري آگالاكسي مسري در استان كردستان وجود داشته و نتايج اين مطالعه پيشنهاد مي كند كه روش واكنش زنجيره اي پليمراز با كاهش زمان انجام آزمايش مي تواند بعنوان يك روش آلترناتيو در كنار كشت استفاده شود.

Contagious agalactiae (C.A.) is one of the most common disease affecting small ruminants which is caused by Mycoplasma agalactiae. This disease is particularly widespread around the world and Iran is one of the countries that C.A. is present. The aim of this study was isolation and identification of M. agalactiae (MG) with culture and PCR technique in milk samples in Kordestan province, Iran. A total of 367 milk samples were collected from sheep and goat. Specific published primers amplify a 375 bp gene of MG were used for PCR. Twenty (5.5%) out of 367 were positive in PPLO agar and 5 (25%) out of these isolates were positive with Mycoplasma agalactiae primers. Four (75%) out of 5 isolates was from sheep and 1(25%) from goat. Result of PCR with 367 milk samples showed that 11(3%) of them were positive with these primers. The isolation of M. agalactiae showed that C.A is present in Kordestan province and our results suggested that PCR method because of reduces the time consuming could be an alternative method beside culture.