Author/Authors :
اسكندري، غفار نويسنده PhD Student in Biotechnology, Institute of Molecular Biology, National Academy of Sciences of Armenia, Yerevan, Armenia Eskandari, .Gh , جلودار، عباس نويسنده Department of Basic Sciences, Faculty of Veterinary Medicine, Shahid Chaamran Uiversity of Ahvaz, Ahvaz, Iran Jolodar, .A , كتسويان، ژانا نويسنده Laboratory of Molecular Genetics, Institute of Molecular Biology, National Academy of Sciences of Armenia, Yerevan, Armenia Ktsoyan, .Z , صيفي آباد شاپوري ، مسعود رضا نويسنده استاد گروه پاتوبيولوژي دانشكده دامپزشكي – دانشگاه شهيد چمران اهواز Seifi-Abad Shapoori, M R
Abstract :
زهر عقربهاي خانواده بوتيده بعنوان اينكه حاوي پروتيين آلفا تك رشته اي با خاصيت بازي كه حاوي حدود 70-60 اسيد آمينه است و بوسيله 4 پل داي سولفيدي محكم شده است، شناخته مي‌شود. مجموع كل RNA از غده زهر عقرب مزوبوتوس اپيوس صيد شده از استان خوزستان ايران خالص سازي گرديد. با استفاده از اين RNA بعنوان رونوشت، و پرايمر اليگو (dT) اصلاح شده cDNA ساخته شد. با استفاده از پرايمرهاي همولوگ و بكار گيري تكنيك Semi-nested RT-PCR، يك قطعه cDNA با اندازه 273 نوكليوتيد تكثير شد كه متعاقبا تعيين توالي گرديد. اين قطعه cDNA حاوي ناحيه كد شونده‌اي بود كه آن ناحيه پپتيدي با 85 اسيد آمينه را كد مي‌نمود كه وزن ملكولي آن 337/9 كيلو دالتون و نقطه ايزو الكتريك آن 52/6 محاسبه گرديد. نام اين پپتيد MeNaTx?-4 قرار داده شد. اين پپتيد با مشابهتي كه با دامين مربوط به "توكسين‌هاي عقرب با زنجيره بلند" نشان مي‌داد، جز سوپر فاميلي توكسين-3 قرار گرفت. همترازي اسيد آمينه اي MeNaTx?-4 نشان داد كه اين پپتيد 95% مشابهت با توكسين آلفا-3 مهار كننده كانالهاي سديمي مربوط به عقرب مزوبوتوس اپيوس آسيايي دارد.
Abstract :
The venoms of Buthidae scorpions are known to contain basic, single-chain protein ?-toxins consisting of 60-70 amino acid residues that are tightly cross-linked by four disulfide bridges. Total RNA was extracted from the venom glands of scorpion Mesobuthus eupeus collected from the Khuzestan province of Iran and then cDNA was synthesized with the modified oligo (dT) primer and extracted total RNA as template. By applying the Semi-nested RT-PCR using homologous primers, the fragments of 273 bp was amplified and sequenced. The coding region encodes a polypeptide of 85 amino acid residues with a calculated molecular weight of 9.337 kDa and theoretical isoelectric point of 6.52. It was designated as MeNaTx?-4. This peptide with homology to the "Scorpion long chain toxin-like domain" is belongs to the Toxin-3 superfamily. Multiple alignment of the putative amino acid sequence of MeNaTx?-4 exhibited 95% sequence identity with lesser Asian scorpion M. eupeus venom sodium channel ?-toxin-3 but interestingly displayed only 63% identity with other ?-toxins from this species. The sequence was also identical to the counterpart sequences from M. martensii (92%) and Buthus occitanus israelis (80%). This high sequence similarity together with completely conserved in the positions of all 8 Cys indicated that MeNaTx?-4 is a new member of ?-toxin from the Iranian M. eupeus which may originate from a common ancestor.
