Author/Authors :
زارع ميرك‌آبادي، عباس نويسنده Department of venomous animals and anti venom production, Razi Vaccine & Serum Research Institute, Karaj, Iran Zare Mirakabadi, .A , قربانپور، محمد نويسنده Department of Chemical Engineering, Amirkabir University, Tehran, Iran Ghorbanpour, .M , صادقي، سحر نويسنده Department of Chemical Engineering, Amirkabir University, Tehran, Iran Sadeghi, .S , سرزعيم ، علي نويسنده ,
Abstract :
هدف از اين تحقيق توليد و شناسايي آنزيم آلفا آميلاز از باكتري باسيل ليچنيفورميس بود. اين باكتري در محيط كشت مايع رشد داده شد. بهترين شرايط براي توليد آميلاز به دست آمد كه شامل دماي 37 درجه سانتي گراد، دوران انكوباسيون 120 ساعت و pH 7 بود. آلفا آميلاز به دست آمده توسط ستون كروماتوگرافي تعويض يوني و ژل فيلتراسيون G100 با 1/19 برابر افزايش داد. فعاليت اختصاصي آنزيم در مقايسه با آنزيم موجود در محيط كشت معادل 47/929 واحد بر ميليگرم پروتيين به دست آمد. آلفا آميلاز به دست آمده داراي حداكثر فعاليت در pH.7 و دماي 65 درجه سانتي گراد بود. وزن مولكولي آلفا آميلاز به دست آمده بر اساس ژل الكتروفورز معادل 72 كيلو دالتون به دست آمد .
Abstract :
The aim of this study was production and partial purification of ?-amylase enzyme by Bacillus licheniformis. B. Licheniformis was allowed to grow in broth culture for purpose of inducing ?-amylase enzyme. Optimal conditions for amylase production by B. Licheniformis are incubation period of 120 h, temperature of 37 °C and pH 7.0. The ?-amylase enzyme was purified by ion exchange chromatography on DEAE-sepharose CL-6B and sephadex G-100 gel filtration with a 19.1-fold increase in specific activity as compared to the concentrated supernatant and with a specific activity of 926.47 U/mg. The ?-amylase had the highest activity at pH 7.0 and 65 °C. According to the data on native polyacrylamide gel electrophoresis, the molecular weight of the purified enzyme was 72 kDa.
