Effect of testosterone on spermatogonial cell colony formation during In vitro co-culture

زمينه مطالعه: فرايند اسپرماتوژنز بوسيله ي فاكتورهاي مختلفي تنظيم مي‌شود. انجام مطالعات بر روي سلول‌هاي بنيادي اسپرماتوگوني ابزار بسيار مهمي را براي بهبود ژنتيك گله و همچنين براي بهبود در زمينه‌هاي مختلف دامي فراهم مي‌كند. 2/0 تا 3/0 % از كل سلول‌هاي لوله‌هاي سمينيفر شامل سلول‌هاي بنيادي اسپرماتوگوني مي‌باشند. براي بررسي و دستكاري زيستي اين سلول‌ها، در ابتدا بايد تكثير و ميزان زنـده مـانـي اين سلول‌ها در محيط آزمايشگاه افزايش داده شوند. هدف:‌ ‌در مطالعه حاضر، اثرات هورمون تستسترون بر روي كلوني‌زايي سلول‌هاي اسپرماتوگوني گوساله در محيط آزمايشگاه مورد بررسي قرار گرفته است. روش كار:‌سلول‌هاي سرتولي و بنيادي اسپرماتوگوني از گوساله‌هاي 5-3 ماهه جداسازي شده اند. شناسايي سلول‌هاي بنيادي اسپرماتوگوني از طريق آناليز ايمونوسيتوشيمي تاييد شده است. هم كشتـي سلـول‌هاي سرتولي و بنيادي اسپرماتوگوني بوسيله ي دوز‌هاي مختلف mmol/L2/0، mmol/L4/0 و mmol/L8/0 هورمون تستسترون قبل از آناليز كلوني‌ها درمان شده‌اند. نتايج: اين مطالعه نشان مي‌دهد كه هورمون تستسترون موجب كاهش تكثير سلول‌هاي بنيادي اسپرماتوگوني نمي‌شود. نتيجه گيري نهايي:‌هورمون تستسترون مي‌تواند به منظور كلوني‌زايي سلول‌هاي اسپرماتوگوني در محيط كشت استفاده شود.

Background: The complex process of spermatogenesis is regulated by various factors. Studies on spermatogonial stem cells have provided a very important tool to improve herd genetic and different field. 0.2 to 0.3 percent of total cells of seminiferous tubules consist of spermatogonial stem cells. To investigate and biomanipulate these cells, first the proliferation and viability rate of cells should be increased in vitro. Objectives: In the present study, the in vitro effects of testosterone on spermatogonial cell colony formation were investigated. Methods: Sertoli and spermatogonial cells were isolated from 3-5-month-old calves. The identity of the cells was confirmed through analysis of immuno-cytochemistry. Co-cultured Sertoli and spermatogonial cells were treated with testosterone in different doses of 0.2 µmol L-1, 0.4 µmol L-1 and 0.8 µmol L-1, before colony assay. Results: testosterone did not decrease the proliferation of spermatogonial stem cells. Conclusions: testosterone can be chosen for in vitro colonization of spermatogonial cells with other factors.