عنوان :
كشت سلولي اوليه از بافت باله دمي ماهي سفيد درياي خزر (Rutilus frisii kutum)
شرح پديد آور/مجري (مجريان) طرح :
ﻗﺎﺳﻤﯽ، محدث
شناسه هاي افزوده :
ﺣﻘﯿﻘﯽ ﮐﺎرﺳيدايي، ﺳﻤﯿﻪ همكارطرح , رﻣﻀﺎﻧﯽ ﻋﺎﻗل، ﺑﺎﺑﮏ همكارطرح , اﻣﯿﺪوار، ﺻﺎدق همكارطرح , شاهرخي، سوسن همكارطرح , ﻃﻬﻤﺎﺳﺒﯽ، ﻧﻮﺷﯿﻦ همكارطرح , نصيري، شكوفه همكارطرح , پورعباس، ناهيد همكارطرح , رﺿﻮاﻧﯽ ﮔﯿﻞ ﮐﻼﺋﯽ، ﻋﻠﯿﺮﺿﺎ همكارطرح , توكل، عباس همكارطرح , صفوي، ابراهيم همكارطرح
تنالگان :
ﺳﺎزﻣﺎن ﺗﺤﻘﯿﻘﺎت، آﻣﻮزش و ﺗﺮوﯾﺞ ﮐﺸﺎورزي ﻣﻮﺳﺴﻪ ﺗﺤﻘﯿﻘﺎت ﻋﻠﻮم ﺷﯿﻼﺗﯽ ﮐﺸﻮر- ﭘﮋوﻫﺸﮑﺪه آﺑﺰي ﭘﺮوري آﺑﻬﺎي داﺧﻠ
چكيده فارسي :
كشت سلول اين امكان را فراهم مي آورد تا تغييرات و آثار آسيب سلولي در محيط كنترل شده مورد بررسي قرار
گيرند. در اين مطالعه كه در سال 1396 انجام شد امكان تهيه كشت سلول اوليه از باله و كليه ماهي سفيد درياي خزر( Rutilus kutum) به دو روش
كاشتن (Explant) با دو تيمار (تيمار با آنزيم و بدون آنزيم تريپسين) و جداسازي آنزيمي با دو تيمار( استفاده و بدون استفاده از همزن مغناطيسي) مورد بررسي قرار گرفت. بدين منظور پس از طي مراحل شستشو و ضدعفوني، سلول ها در محيط كشت 15-L حاوي 20 درصد سرم جنين گوساله و آنتي بيوتيك در فلاسك هاي كشت سلول cm2 25 كاشته شدند. در روش آنزيمي با استفاده از همزن قطعات بافت با ظرفي حاوي تريپسين بر روي استيرر قرار گرفته ولي در روش بدون همزن قطعات بافت بر روي استيرر قرار نميگرد، در انتها در هر دو روش بافت ها سانتريفيوژ شده و در فلاسك هاي كشت سلول كاشته مي شوند. سپس بعد از گذشت 7 الي 10 روز زماني كه سلول ها 70 درصد كف فلاسك را پوشاندند در هر دو روش اقدام به پاساژ سلول ها گرديد، سلول ها توسط 3 سي سي آنزيم تريپسين از كف فلاسك جدا شدند و پليت سلولي حاصل به فلاسك كشت جديد منتقل شد. در مقايسه كلي بين روش هاي توليد كشت اوليه، روش جداسازي آنزيمي توسط آنزيم تريپسين با استفاده از همزن مغناطيسي موفق تر بود و نتايج نشان داد شرايط بهينه براي كشت اوليه سلولهاي باله و كليه ماهي سفيد محيط كشت 15-L به همراه 20 درصد سرم جنين گوساله، pH ،
7/2 و دماي 24 درجه ي سانتي گراد مي باشد. تا كنون 12 پاساژ از سلول هاي باله ماهي سفيد انجام شده و سلول ها از رشد خوبي نيز برخوردار هستند. با توجه به تكثير و پاساژ مناسب سلول هاي بدست آمده مي توان از اين كشت سلولي براي تحقيقات ويروس شناسي، سم شناسي و ايمني شناسي استفاده كرد، اما سلول هاي كليه علي رغم مهاجرت سلول 88737 درصد، تا 5 پاساژ تكثير شدند و پس از آن تكثير مناسبي صورت نگرفت.
چكيده انگليسي :
Abstract
In the present study, the primary cell lines were derived from caudal fin explants of the
Caspian Kutum (Rutilus frisii kutum), using two treatments (tissue culturing without enzyme
and after trypsin treatment). For this purpose, pieces of caudal fin tissue (1 millimeter cubic)
were isolated from 10 healthy young fish with an average weight of 12±1 g and a mean length
of 11±1cm in sterile condition then were explanted in L-15 medium (Leibovitz L-15) with
fetal bovine serum (10 and 20%) and penicillin-streptomycyne at pH 6.8 and 7.2 and kept at
21 and 24 °C. From the second day, a mixture of various cell types was observed and attached
to the cell culture flask, but the uniform cell layer consist of cells with heterogeneous
epithelial morphology and fibroblast-like were appeared after 12 to 14 days. Subculture was
performed using trypsin enzyme. In subcultures, a single cell layer consists of cells with
homogeneous epithelial morphology was formed. So far, these cells have been passaged for
21 times. Results indicate the possibility of producing a permanent cell line from the fin tissue
of Rutilus frisii kutum
كليدواژه :
كشت بافت , باله دمي , ماهي سفيد درياي خزر
اطلاعات نشر :
تهران ﻣﻮﺳﺴﻪ ﺗﺤﻘﯿﻘﺎت ﻋﻠﻮم ﺷﯿﻼﺗﯽ ﮐﺸﻮر
مشخصات ظاهري :
ﺗﺼﺎوﯾﺮ، ﺟﺪاول، ﻣﻨﺤﻨﯽ ﻫﺎ و ﻧﻤﻮدار
فروست :
ﻣﻮﺳﺴﻪ ﺗﺤﻘﯿﻘﺎت ﻋﻠﻮم ﺷﯿﻼﺗﯽ ﮐﺸﻮر 58227
