چكيده فارسي :
خيارهاي دريايي يكي از مهم ترين گونه‌هاي خارپوستان متعلق به رده خيارسانان مي باشد كه بدليل وجود برخي تركيبات زيست فعال شناخته شده داراي خواص دارويي، بهداشتي و آرايش از قبيل اثرات ضد سرطان، ضد انعقاد، ضد فشار خون، ضد التهاب، ضد ميكروبي، آنتي اكسيداني، ضد تصلب شرائين، ضد توموري و تسريع در بهبود زخم مي باشد. حضور تركيباتي چون ساپونين ها، كندرويتين سولفات، گلوكزآمينوگليكان، پلي ساكاريدهاي سولفاته، گليكوپروتئين، گليكواسفنگوليپيدها و اسيد هاي چرب ضروري، منشاء وجود چنين خواص زيستي در آن ها است. هدف از اجراي اين طرح تحقيقاتي بررسي برخي خواص غذائي داروئي ، بهداشتي و آرايشي تركيبات خيارهاي دريائي خليج فارس و درياي عمان بوده است. براي دستيابي به اهداف طرح، چهار پروژه تحقيقاتي شامل: بررسي امكان توليد كپسول از پودر سه گونه خيار دريايي( Scabra Holothuria loeucospilata, Stihcopus hermani ,Holothuria )، بررسي امكان توليد صابون با كاربرد آرايشي و بهداشتي از پودر، عصاره وساپونين خيار دريايي ( Holothuria leucospilota )، استخراج پپتيدهاي زيست فعال از خيار دريايي گونه (Holothuria leucospilota) و بررسي اثرات ضد التهابي عصاره خيار هاي دريائيHolothuria leucospilota ،Holothuria parva توسط چهار مجري اجرا گرديد كه گزارش هر پروژه در فصل جداگانه در گزارش اين طرح آورده شده است.
در پروژه "بررسي امكان توليد كپسول از پودر سه گونه خيار دريائي" گونه هاي Scabra, Holothuria loeucospilata, Stihcopus hermani ,Holothuria خيار دريايي پس از آماده سازي بوسيله آسياب بصورت پودر شد و پودر خشك در كپسول هاي 500 ميلي گرمي پرشد. بازده توليد پودر، مقدار تركيبات تقريبي و تركيب اسيد هاي امينه پودر خيارهاي دريائي اندازه گيري شد. نتايج نشان دادكه بازده توليد پودر در سه گونه از 9- تا 5/10 درصد متغيير بوده است همچنين هر دو گونه S. herrmani و گونه H. leucospilota از پروتئين بالا (بيشتر از 30%) برخوردار هستند. از نظر اسيد هاي امينه، در هردو گونه بيشترين مقدار مربوط به اسپارتيك اسيد بود. مقدار اين اسيد امينه در گونه S. herrmani 28.5 و در گونه H. leucospilota 36.91 درصد بدست آمد. كمترين مقدار اسيد امينه نيز در گونه S. herrmani ليزين با 6.25% و در گونه H. leucospilota آرژنين با 13.43% بوده است.
در پروژ "بررسي امكان توليد صابون با كاربرد آرايشي و بهداشتي از پودر عصاره وساپونين خيار دريايي Holothuria leucospilota "، به بررسي خواص باكتري و توليد صابون از پودر، عصاره متانولي و ساپونيني خيار دريايي گونه هولوتوريا لوكوسپيلاتا پرداخته شده است. در اين پروژه تحقيقاتي نمونه هاي خيار دريايي پس از آماده سازي خشك و سپس پودر شدند. عصاره گيري با استفاده از حلال هاي متانول به منظور دست يابي به عصاره تام و اتانول 70 درصد به منظور تهيه عصاره حاوي بيشترين مقدار تركيبات ساپونيني با استفاه از روش خيساندن انجام شد. به منظور تعيين كيفت ساپونين تعيين انديس كف¬كنندگي ساپونين انجام شد. توليد صابون از خيار دريايي به روش هاي استفاده از روش صابوني شدن چربي ها و گليسيرين انجام شد. در نهايت با استفاده از پودر؛ عصاره خشك متانولي و ساپونيني با نسبت هاي 1، 5 و 10 درصد صابون هاي خيار دريايي تهيه شدند. به منظور بررسي اثرات ضد باكتري با استفاه از روش رقت لوله ايي اثر عصاره ها و صابون هاي تهيه شده روي سويه باكتري استافيلوكوكوس آرئوس عامل جوش صورت انجام شد كه اثرات ضدجوش عصاره و صابون از خيار دريايي هولوتوريا لوكوسپيلاتا از جزيره لاوان پرداخته شده است اثر ضدباكتريايي آن روي عامل جوش صورت در آزمايشگاه تأييد شده است، بنابراين بنظر ميرسد تركيبات مورد مطالعه مي توانند به عنوان انتخاب مناسب براي توليد صابون هاي ضدجوش پس از مطالعات تكميلي بارعايت ساير مقررات، دستورالعمل ها و استاندارهاي وزرات بهداشت ، درمان و آموزش پزشكي و ساير مراجع مسئول ديربط مورد استفاده قرار بگيرد.
در پروژه "استخراج پپتيدهاي زيست فعال از خيار دريايي(Holothuria loeucospilata )و ارزيابي اثرات ضد ويروسي و آنتي اكسيداني آن" ، پروتئين هيدروليز شده با وزن مولكولي كمتر از 30 كيلو دالتون از خيار دريايي گونهleucospilata H. با استفاده از هيدروليز آنزيم¬هاي آلكالاز و فلورزايم استخراج شده است. فعاليت آنتي اكسيداني پروتئين هيدروليز شده با آزمون DPPH و FRP، اثر آنتي ويروسي آن بر سلول هاي ويروسي هرپس ويروس تيپ 1 (Hsv-1)، هرپس ويروس تيپ 2 (Hsv-2)، Chikungunya و Dengue بررسي شد. نتايج نشان دادكه در تست هاي آنتي اكسيداني قدرت مهار كنندگي راديكال آزاد و قدرت كاهندگي آهن در نمونه پروتئين هيدروليز شده leucospilata H. با آنزيم آلكالاز و فلورزايم با افزايش غلظت روند افزايشي داشته و اختلاف معناداري بين غلظت¬هاي مختلف مورد مطالعه وجود دارد (05/0>P). مطابق نتايج حاصله اثرات مهاركننده پپتيدهاي استخراج شده با آنزيم آلكالاز بالاتر از فلورزايم بوده و غلظت 5 ميلي گرم/ميلي ليتر پپتيدهاي گونهleucospilata H.، اثرات مهاركنندگي بيشتري بر روي ويروس¬هاي مورد مطالعه به ويژه هرپس ويروس تيپ 1 داشته است. اين امر نشان دهنده اثر ضد ويروسي بالاي اين پپتيد بر روي سلول هاي ويروسي ميزبان است. در مجموع نتايج مطالعه حاضر نشان دهنده آن است كه پروتئين هيدروليز شده با وزن مولكولي كمتر از 30 كيلو دالتون ميتواند بارعايت قوانين و مقررات ، استاندارها و دستورلعمل هاي وزارت بهداشت، درمان و آموزش پزشكي و ساير مراجع ديربط به عنوان يك منبع طبيعي در صنايع دارويي و غذايي استفاده شود.
در اجرا پروژه "بررسي اثرات ضد التهابي عصاره دو گونه خيار دريائيHolothuria leucospilota ،Holothuria parva"، عصاره ديواره عضلاني بدن خيار هاي دريايي Holothuria leucospilota و Holothuria parva حاصل از حلال هاي هگزان، كلروفورم و متانول مورد استفاده قرار گرفت. خيارهاي دريايي بعد از آماده سازي و خشك كردن نمونه ها و تهيه پودر با استفاده از حلال هاي هگزان، استون و متانول به صورت متوالي عصاره گيري شدند. در اين مطالعه كليه عصاره ها بوسيله آزمايش مهاركننده آنزيم هاي ليپوكسي ژناز در شرايط in vitro مورد ارزيابي قرار گرفت و در ادامه بهترين عصاره كانديد براي انجام تست هاي in vivo انتخاب شد. در آزمايش هاي in vivo از 30 سر رت نر استفاده شد. در آزمون هاي ارزيابي كننده اثرات ضد التهابي، حيوانات (رت) به 5 گروه 6 تايي شامل: كنترل، گروه تيمارشده با كاراگينان، گروه¬هاي تيمار شده با عصاره MEHL (mg/kg 200،100) و آسپرين mg/kg10 تقسيم شدند. به منظور ارزيابي التهاب از تستكاراگينان در روش Hind paw edema، استفاده شد. همه عصاره ها با غلظت 10 ميلي گرم در ميلي ليتر در آزمايش آنزيمي ليپوكسي ژناز داراي اثرات مهار كنندگي بودند. عصاره متانولي هر دو گونه خيار دريايي داراي مهار كنندگي بهتري نسبت به سايرر عصاره ها بودند و عصاره متانولي (MEHL) حاصل از گونه Holothuria leucospilota داراي اثر مهاركنندگي بهتري بود. بنابراين براي آزمايش هاي بعدي انتخاب شد. در آزمايش هاي حيواني كه عصاره متانولي با غلظت هاي 100 و 200 ميلي گرم بر كيلوگرم استفاده شد سبب ايجاد اثر ضد التهابي معني داري (0/05p<) نسبت به گروه كنترل گرديد. به نظر مي رسد عصاره متانولي خيار دريايي Holothuria leucospilota داراي تركيباتي مي باشد كه داراري اثرات ضد التهابي مي باشد و مي توان با انجام پروژه هاي تكميلي تركيبات داراي خواص ضد التهابي را شناسايي با رعايت قوانين و مقررات ريال دستورلعمل ها و استاندارهاي وزارت بهداشت ، درمان و آموزش پزشكي در توليد داروها ي ضد التهابي از آنها استفاده كرد.
چكيده انگليسي :
Abstract
The aim of this study was to investigate on food, drug and cosmetic properties of Sea cucumbers components in Persian Gulf and Oman Sea. For achieving to this propose, four reasech projects including “Possibility of production the edible capsule production for human consumption, Extraction of bioactive peptides from the sea cucumber (Holothoria leucospilota), Possibility of soup production using powder and sea cucumber extraction and evaluation of seacucumber antiviral and anioxidant activity, were designed. For possibility of production the edible capsule production for human consumption project, three sea cucumber species (Holothoria Scabra, Holothoria leucospilota, Stihcopus hermani) were collected from 5 meter deep of sea water around Qusem Inland. The samples were transported using ice powder to Khalig Fars and Oman sea institute. Wight and length of samples were determined immediately after receiving to the biotechnology Lab. After that the samples gutted and cooked in 10- 15 min in boiling water and dried in the Oven in 40 C for 3 days. The dried samples were put in boiling water for 10-15 min for second time and dried for 7 days in 45 C. The dried samples were powdered by using blender. Sea cucumber powder was capsulated using 500mg capsule. Yield powder, proximate and amino acid composition of the sea cucumber powder was determined. Results indicated that powder yield of the three species of sea cucumbers were varied from 9-10.5 percent of the wet weight. Both samples Holothuria loeucospilata, Stihcopus hermani had high protein (30- 32) percent of the dried powder. Aspartic acid was the most amounts of the amino acid were found in both of the samples. The least of the amino acids were Lysin and Arginine which found in S. herrmani and Holothuria loeucospilata respectively. Due to exist of the different kinds of sea cucumbers and their biological properties, in study of the antibacterial properties and the soap forming ability of powder, methanolic and saponins extracts of sea cucumber (Holothuria leucospilota). obtained from Lavan Island, were evaluated. Initially Sea cucumbers were dried and subsequently ground. Extraction was performed by methanol solvents to obtain total extract and 70% ethanol. The method of soaking was used in order to prepare the extract containing the ultimate amount of saponin compounds. With the aim of determine the quality of saponin, its index of foam forming ability was evaluated. The production of soap from marine cucumbers was carried out using the method of soaping fats and glycerin. Finally, sea cucumber soaps were produced using powder, methanolic and saponins extracts with ratios of 1, 5 and 10%. In order to fulfill of bacterial analysis, the effect of extracts and prepared soaps on Staphylococcus aureus was evaluated using tubular dilution method. The results of the experiment show that the minimum inhibitory concentration (MIC) of the methanolic extract and marine cucumber soap for Staphylococcus aureus is 10 and 5 mg / ml respectively. This index for saponin and its soap is 2 and 5 mg / ml. The produced foam of the sea cucumber saponin remained for more than 12 hours, indicating a very high foam formin ability. In this project, the antibacterial and consequently anti- pimple of extracts and soaps produced from the Holothuria leucospilota obtained from Lavan Island were studied and confirmed. Therefore, this compounds can be used as an appropriate choice for the production of anti-pimple soaps. In extraction of bioactive peptides from the sea cucumber (Holothuria leucospilota) and evaluation of it, s antiviral and anioxidant activity project, Sea cucumber (Holothuria leucospilota) this study was conducted to investigate the cytotoxic and antioxidant properties of hydrolyzed protein with molecular weight less than 30 kD, extracted from sea cucumber using hydrolysis of alkaline and fluorazim enzymes. The antioxidant activity of the hydrolyzed protein by DPPH and FRP tests on viral herpesvirus type 1 (Hsv-1), type 2 herpesvirus (Hsv-2), Chikungunya and Dengue were examined. The results showed that in the antioxidant tests, free radical inhibitory potency and iron deficiency in the hydrolyzed H. leucospilota protein sample with alkaline and fluorosome enzymes increased with increasing concentrations and there was a significant difference between the different concentrations (P>0.05). According to the results, the inhibitory effects of peptides extracted by the alkaline enzyme were higher than fluoresim, and the concentration of 5 mg/ ml peptides of H. leucospilota had more inhibitory effects on the viruses studied, especially on type 1 herpesvirus (HSV-1). This result indicates the cytotoxic effect of studied peptide on cell viruses. Overall, the results of this study indicate that a hydrolyzed protein of H. leucospilota with a molecular weight of less than 30 kDa can be used as a natural source in the pharmaceutical and food industries. For invrstigate the Evaluation of anti-inflammatory effects sea cucumbers (Holothuria leucospilota ،Holothuria parva) extract, in this study, the anti-inflammatory effect of the muscle wall extract of Holothuria leucospilota, Holothuria parva of hexane, chloroform and methanol solvents were used. Sea cucumbers were Hunted from the north of the island from a depth of 15 to 20 meters. After preparing and drying the specimens and preparing the powder, hexane, acetone and methanol were extracted successively. In this study, all extracts were evaluated by in vitro lipoxygenase inhibitor assay and the best candidate extract was selected for in vivo testing. In vivo experiments, 30 male rats were used. In the anti-inflammatory evaluation, animals were divided into 5 groups of 6 rats, control, carrageenan, treated with extract (100 and 200 mg / kg) and aspirin (10 mg / kg). The Hind paw edema method was used to evaluate the inflammation of the cariogenic test. All extracts of 10 mg / ml in the lipoxygenase enzyme test had inhibitory effects, but methanolic extract of both cucumber species had a better inhibitory effect, but the methanolic extracts from Holothuria leucospilota had a better inhibitory effect, so for testing Subsequent selection. In in vivo experiments, methanolic extracts with doses of 100 and 200 mg / ml caused a significant anti-inflammatory effect (p <0.05) compared to the control group (). The methanolic extract of Holothuria leucospilota caviar contains compounds that have anti-inflammatory effects and can be used to identify complementary compounds with anti-inflammatory properties and to use anti-inflammatory drugs.
كليدواژه :
خيار دريائي , آرايشي و بهداشتي , جزيره لاوان , خليج فارس پپتيدهاي زيست فعال , كپسول , پودر خيار دريايي
