عنوان :
شناسايي و جداسازي ژن عامل استرپتوكوكوزيس از استرپتوكوكوس اينيايي و ثبت آن در بانك ژن
شرح پديد آور/مجري (مجريان) طرح :
پورغلام، رضا
شناسه هاي افزوده :
شريف روحاني، مصطفي ، همكارطرح , لالوئي، فرامرز ، همكارطرح , رضواني گيل كلائي، سهراب ، همكارطرح , غرقي، احمد ، همكارطرح , تقوي، محمد جواد ، همكارطرح , پورغلام، حمزه ، همكارطرح , كاظمي، بهرام ، همكارطرح
تنالگان :
وزارت ﺟﻬﺎد ﮐﺸﺎورزي - ﺳﺎزﻣﺎن ﺗﺤﻘﯿﻘﺎت، آﻣﻮزش و ﺗﺮوﯾﺞﮐﺸﺎورزي - ﻣﻮﺳﺴﻪ ﺗﺤﻘﯿﻘﺎت ﻋﻠﻮم ﺷﯿﻼﺗﯽ ﮐﺸﻮر
چكيده فارسي :
استرپتوكوكوس اينيه بيماريزاي مهم در آبزيان عامل عفونت هاي سيستميك در هر دو ميزبان مي باشد. علائم عفونت هاي حاصل از آن بسيار مشابه علائم ايجاد شده توسط استرپتوكوك هاي مهاجم ويژه انسان است. آنزيم فسفوگلوكوموتاز به عنوان مهمترين عامل در توليد كپسول پلي ساكاريدي و بيماريزايي استرپتوكوكوس اينيه شناسايي شده است هدف از اين بررسي، جداسازي استرپتوكوكوس اينيه و كلونينگ ژن pgm در باكتري E.coli بوده است.
استرپتوكوكوس اينيه روي محيط آگار خوندار پس از 24 ساعت شرايط انكوباسيون در دماي 37 درجه سانتي گراد، بصورت كلني هاي موكوئيدي همراه با هموليز بتا رشد كرد و با واكنش حساس PCR تائيد شد. ژن فسفوگلوكوموتاز با موفقيت تكثير داده شد و در وكتور pTZ57R/T كلون گرديد و پس از هضم آنزيمي در وكتور بيان petDuet-1 ساب كلون گرديد و به روش PCR تائيد گرديد.
اگرچه استرپتوكوكوس اينيه باكتري مهمي از نظر اقتصادي مي باشد اما مطالعات چنداني درباره مكانيسم بيماريزايي آن انجام نشده است. اما اثبات شده كه آنزيم فسفوگلوكوموتاز، نقش مهمي در استحكام ديواره سلولي و مقاومت به عوامل ضد ميكروبي دارد. با توجه به اينكه استرپتوكوكوس اينيه از نمونه هاي مورد بررسي در اين مطالعه نيز جدا شد، بنابراين اين آنزيم كانديد مناسبي به عنوان تهيه واكسن جهت پيشگيري و همچنين تحقيقات بيشتر مي باشد.
چكيده انگليسي :
Abstract
S. iniae is an important pathogen in both marin animals and humans, causing systemic infections in these hosts. The symptoms of infections are very similar to symptoms of infections caused by human¬specific streptococcal pathogens. The enzyme phosphoglucomutase (PGM) has recently been discovered to play an important role in polysaccharide capsule production and virulence in s. iniae. We aim to isolate S. iniae and cloning phosphoglucomutase gene.
S. iniae grew on sheep blood agar as mucoid and beta- hemolytic colonies after 24 h of incubation at 37C. Then confirmed it by sensitive and rapid method of PCR.
The pgm gene was amplified successfully and cloned in pTZ57R cloning vector.The recombinant plasmid was sub cloned into pETDuet-l expression vector by rectriction enzymes and confirmed by PCR.
Although S. iniae is a pathogen of economic importance, relatively little is known regarding mechanisms of its pathogenesis and few specific virulence determinants have been established. These include the enzyme phosphoglucomutase which contributes to cell wall integrity and resistance to antimicrobial peptides. Thus, this enzyme is the best choice to product the vaccine and more investigations.
كليدواژه :
شناسايي و جداسازي , ژن عامل استرپتوكوكوزيس , بانك ژن , استرپتوكوكوس اينيايي
اطلاعات نشر :
تهران موسسه تحقيقات علوم شيلاتي كشور
مشخصات ظاهري :
جدول، مصور
فروست :
موسسه تحقيقات علوم شيلاتي كشور 43529
كتابنامه :
كتابنامه: ص. 26
موضوع :
ماهي ها- بيماري ها , آبزيان- بيماري ها , ماهي ها- عفونت
