مرکز منطقه ای اطلاع رساني علوم و فناوري - انتقال ، خالص سازي ، پراكندگي و تعيين برخي خصوصيات فيزيكوشيميايي جدايه ايراني ويروس كوتولوگي پيسه اي بادنجان

چكيده :

جدايه ايراني ويروس كوتولگي پيسه اي بادنجان با استفاده از بافر فسفات 0/1 مولار، PH=2/7 ، با راندمان انتقال كم به طور مكانيكي منتقل شد. خالص سازي پيكره كامل ويروس با همگن سازي بافت آلوده گياهان N. tabacum var. Turkish, N. glutinosa در بافر سيترات 0/1 مولار، PH= 5/6 ، اسيدي كردن عصاره تا 5/4 PH = ، سانتريفوژ كردن افتراقي و سانتريفوژ كردن در ستون هاي با شيب پله اي سوكروز يك لايه مشخص ايجاد كردند ولي باند مربوط به بافت آلوده ضخامت بيشتري نسبت به لايه مربوط به گياه سالم داشت و داراي طيف جذبي مانند كليوپروتيين ها بود. خالص سازي نوكليوكپسيد ويروس با اضافه كردن Triton x-001 به عصاره ، سانتريفوژ كردن افتراقي و سانتريفوژ كردن در ستون هاي داراي شيب چگالي سوكروز انجام شد. خالص سازي نوكليوكپسيد ساده تر و داراي عملكرد بالاتري نسبت به پيكره كامل ويروس بود. آموده هاي خالص شده پيكره كامل و نوكليوكپسيد به خرگوش تزريق شد. آنتي سرم توليد شده عليه پيكره ها كامل هم با عصاره گياه سالم و هم با عصاره گياه آلوده واكنش داشت و پس از جذب با آموده گياه سالم واكنش ضعيف ولي مشخص با عصاره گياه آلوده به ويروس نشان داد. آنتي سرم عليه نوكليوكپسيد هيچگونه واكنشي با عصاره گياه سالم نداشت و ايجاد يك واكنش قوي و مشخص با عصاره گياه آلوده كرد. عيار آنتي سرم عليه پيكره كامل و آنتي سرم عليه نوكليوكپسيد در مقابل عصاره رقيق نشده بادنجان آلوده در آزمون نشت دو طرفه در اگار به ترتيب 1/8 و 1/128 بود. آنتي سرم عليه پيكره كامل توليد دو خط رسوبي مشخص كرد ولي آنتي سرم عليه نوكليو كپسيد تنها يك خط رسوب قوي در مقابل عصاره بادنجان آلوده داشت .