الاكسدة الانزيمية المحفزة بانزيم اللاكاز للكاتشين في وسط ثنائي الطور (عضوي/مائي) والفعاليات البيولوجية للمنتجات النهائية الموافقة

تم في هذه الدراسة التحري وبطريقة صديقة للبيئة عن امكانية تركيب مركبات مشابهة للطبيعية ومستقرة عن طريق الاكسدة الانزيمية للكاتيشين المحفزة بانزيم اللاكاز في وسط ثنائي الطور ( عضوي _مائي). اختير الكاتيشين كونه يشكل احدى الفلافونيدات الاكثر فعالية والموجودة في غذاء الانسان، بالاضافة الى امتلاكه للعديد من الخصائص الحيوية المهمة. كذلك، هدف هذا البحث الى استغلال الاكسدة الانزيمية للكاتيشين المحفزة بانزيم اللاكاز في وسط ثنائي الطور ( عضوي _مائي) بهدف زيادة انحلالية النواتج ومنع اسمرارها اللاحق وتحسين خصائصها الحيوية. تمت اكسدة الكاتيشين المحفزة بانزيم اللاكاز من فطر Myceliophthora thermophila في وسط مائي ووسط ثنائي الطور ( عضوي _ مائي) بهدف انتاج جزيئات حيوية جديدة. سمحت تقنية الترشيح الفائق لانزيم اللاكاز التجاري بازالة الملوثات الفينولية وزيادة الفعالية النوعية للانزيم بمقدار ضعفين. افضت اكسدة الكاتيشين في نظام ثنائي الطور(عضوي – مائي) الممزوج بشكل تام والمكون من دارئة فوسفاتية والاتيل اسيتات الى نواتج برتقالية اللون وذات ثباتية عالية. بالمقارنة مع الوسط المائي، يقدم الوسط ثنائي الطور (عضوي – مائي) العديد من الايجابيات المهمة مثل التقليل من الفعالية الانزيمية والزيادة في الوقاية من تطور تفاعلات السمرة الانزيمية اللاحقة، وكذلك زيادة انحلالية وثباتية النواتج الوسيطة النهائية للتفاعل. وبناء عليه، يمكن القول بان الوسط ثنائي الطور يسهل فصل هذه النواتج والتي تكون عادة منحلة فقط في الطور العضوي لهذا النظام. في الواقع، ابدت هذه النواتج الوسيطة النهائية في الزجاج فعالية مضادة لليشمانيا وخصوصا مشيقات الليشمانيا المدارية L. tropica اكبر من الكاتيشين والدواء المرجعي (الغلوكانتيم). علاوة على ذلك، مكنت الاكسدة الانزيمية من زيادة الفعالية الممخلبة لشوارد الاكسجين الموكسدة الحرة والسمية الخلوية تجاه الخلايا المشتقة من البطانة الداخلية للحبل السري HUVEC)) بالمقارنة مع جزيء الكاتيشين الاحادي غير الموكسد. ايضا، اظهرت النواتج النهائية لاكسدة الكاتيشين قدرة تثبيطية لفعالية انزيم الاكزنتين اوكسيداز والمسبب لتراكم حمض البول في الجسم. وبالنتيجة، مكنت هذه الطريقة الانزيمية في وسط ثنائي الطور(عضوي – مائي) من الحصول على مركبات جديدة والتي تجسد العديد من الخصائص المهمة مثل اللون والفعالية المضادة لليشمانيا والمضادة للاكسدة والسمية الخلوية والفعالية المضادة لانزيم الاكزنتين اوكسيداز، مما يجعلها مرشحة للاستخدام في العديد من الصناعات الصيدلانية والغذائية والطبية.