شماره ركورد كنفرانس :
3239
عنوان مقاله :
استفاده از امواج اولتراسونيك جهت استخراج سريع DNA از خون محيطي و شناسايي جهش با روش TTGE
پديدآورندگان :
حيدري محمدمهدي دانشگاه يزد - دانشكده علوم پايه - گروه زيست شناسي , خاتمي مهري دانشگاه يزد - دانشكده علوم پايه - گروه زيست شناسي
كليدواژه :
استخراج DNA , TTGE , امواج اولتراسونيك , ژنوم ميتوكندري
عنوان كنفرانس :
هفدهمين كنگره زيست شناسي
چكيده فارسي :
روشهاي معمول استخراج DNA از خون، مبتني بر استفاده از فنل/كلروفرم است. در اين تحقيق از امواج اولتراسونيك جهت استخراج DNA و روش TTGE جهت شناسايي جهش استفاده گرديد. روش مطالعه: پس از حذف گلبولهاي قرمز از خون محيطي از امواج اولتراسونيك با شدت W30 جهت شكستن غشاء سلولي استفاده شد. ژن tRNALue با واكنش PCR تكثير گرديد و براي واكنش TTGE مورد استفاده قرار گرفت. يافته ها و بحث: با اين روش مدت زمان لازم براي استخراج DNA به حداكثر 45 دقيقه ميرسد و با توجه به آنكه اين روش PH محلول DNA را تغيير نميدهد، تركيب مهار كنندهاي براي واكنش PCR نيز وجود ندارد. روش TTGE داراي حساسيت بسيار بالايي است بطوري كه ميتواند حتي جهشهاي ميتوكندريايي در حد 4% هتروپلاسمي را در قطعهاي بطول kb 1 تشخيص دهد. با روشي كه در اين تحقيق ارايه شده است، مي¬توان با صرف زمان و هزينه كمتر جهش هاي ژني در ژنوم ميتوكندري را به راحتي غربالگري و شناسايي نمود.