جداسازي و شناسايي باكتري هاي پروبيوتيك بيفيدوباكتريوم از لبنيات بومي شهرستان جيرفت

Isolation and identification of probiotic bacteria of Bifidobacterium from native dairies of Jiroft city

اين مطالعه به منظور جداسازي و شناسايي بيوشيميايي و مولكولي باكتري هاي بيفيدوباكتريوم با پتانسيل پروبيوتيكي در محصولات لبني بومي و سنتي شهرستان جيرفت انجام گرفت. 10 نمونه محصول لبني (3 نمونه شير، 4 نمونه ماست و 3 نمونه دوغ) از منـاطق مختلف شهرستان جيرفت جمع آوري شد. نمونه هاي لبني ابتدا در محيط MRS براث غني سازي و سپس بر روي محيط MRS-NPLN آگار كشت داده شدند. براي شناسايي اوليه باكتري هاي بيفيدوباكتريوم از تست هاي گرم، اكسيداز، كاتالاز، ايجاد لخته در شيرخشك بدون چربي و توليد گاز وجهت تاييد وجود باكتري هاي بيفيدوباكتريوم از تست مقاومت به موپيروسين و آنزيم فروكتوز6-فسفات فسفوكتولاز (F6PPK) استفاده شد. علاوه در اين تحقيق به طور همزمان با استفاده از تكنيكPCR تكثير نواحي از ژن 16SrDNA بطول 523 جفت باز به تاييد باكتري هاي جدا شده پرداخته شد. در نهايت محصولاتPCR پس از خالص سازي، تعيين توالي گرديد. نتايج نشان داد ازمجموع 10 نمونه لبني جمع آوري شده، 6 نمونه مثبت بدست آمد، كه بر اساس تست هاي بيوشيميايي و مولكولي 3 باكتري بيفيدوباكتريوم شناسايي شدند. باكتري هاي بيفيدوباكتريوم شناسايي شده شامل بيفيدوباكتريوم انيماليس زيرگونه لاكتيس، بيفيدوباكتريوم لانگوم و بيفيدوباكتريوم بيفيدوم بودند. يافته هاي حاصل از اين مطالعه نشان داد كه محصولات لبني شهرستان جيرفت داراي باكتري هاي بيفيدوباكتريوم كه يكي از مهمترين گونه هاي پروبيوتيكي شناخته شده است مي باشند.

This study was conducted to isolate and the biochemical and molecular identifications of Bifidobacteria with probiotic potential in native and traditional dairy products of Jiroft city. 10 samples of dairy products (3 milk samples, 4 yoghurt samples and 3 dough samples) were collected from different areas of Jiroft city. The dairy samples were first enriched in MRS broth and then cultured on MRS-NPLN agar medium. For initial identification of Bifidobacteria, Gram tests, oxidase, catalase, flocculation in skim milk and gas production, and for confirmation of the presence of Bifidobacteria, resistance to mupirocin test and Fructose-6 phosphate phospho ketolase enzyme (F6PPK) were used. In addition to this study, the replication of 16SrDNA regions of 523 bp was confirmed by isolation of bacteria using PCR technique. Finally, PCR products were sequenced after purification. The results showed that from 10 collected dairy samples 6 samples were positive, which were identified by biochemical and molecular tests of Bifidobacteria. Identified Bifidobacteria were including Bifidobacterium animalis subs. Lactis, Bifidobacterium Longum and Bifidobacterium bifidum. The findings of this study showed that dairy products in Jiroft city have Bifidobacteria that are one of the most important probiotic species known.