بيان و تخليص آلفاآميلاز نوتركيب در مخمر ساكارومايسس سرويزيه

با توجه به نياز روز افزون به آنزيم ها، توليد انواع نوتركيب آن ها موجب ايجاد صفات مطلوبي در آن ها مي شود. ميكروارگانيسم ها به دليل دست ورزي و كشت آسان، مقرون به صرفه بودن و نيز توليد كنندگي بيشترشان نسبت به ساير موجودات از جمله گياهان و جانوران، ميزبان هاي مناسبي براي توليد آنزيم ها از جمله آلفا-آميلاز هستند. مخمر ساكارومايسس سرويزيه به عنوان يك ميكروارگانيسم مدل يوكاريوتي ويژگي هاي مطلوبي براي توليد پروتئين هاي نوتركيب در خود دارد. براي بيان يك ژن خارجي در اين موجود ميزبان فاكتورهايي همچون ترجيح كدوني و درصد GC بايد مورد بررسي قرار گيرند. شرايط محيطي در ميزان و كيفيت آنزيم هاي توليد شده تاثير ويژه اي مي گذارند. علاوه بر عوامل محيطي، فاكتورهايي مثل توالي سيگنالي و حامل مورد استفاده براي كلون سازي ژن و به طبع آن نوع پروموتر آن حامل، بر بيان ژن در ساكارومايسس سرويزيه اثر گذارند. به طور اختصاصي براي تاييد بيان آلفا-آميلاز روش هاي كيفي و كمي مختلفي وجود دارد از جمله: سنجش كيفي به روش بردفورد، الكتروفورز و اثبات وجود mRNA. بر خلاف مصارف صنعتي، كاربرد آنزيم ها در حوزه هاي پزشكي و داروسازي نيازمند خلوص بالاي آن هاست. براي تخليص مولكول هاي زيستي از ويژگي هاي منحصر به فرد آن ها بهره گيري مي شود.