رديابي ارليشيا در كنه هاي جداشده از سگ‌ها در جنوب شرقي ايران

ارليشيوز نوعي بيماري باكتريايي مشترك بين انسان و حيوانات است كه در اثر باكتري كوچك داخل سلولي اجباري ارليشيا ايجاد مي شود . شايع ترين گونه بيماري زا در سگ ارليشيا كنيس است كه خصوصاً به علت حضور وسيع كنه هاي ريپي سفالوس سنگوينئوس كه بيشترين پراكندگي را در جهان به ويژه در مناطق گرمسيري و نيمه گرمسيري دارد با شيوع بالاتري گزارش شده است . در اين تحقيق به منظور تاييد آلودگي ارليشيا در جمعيت كنه هاي ريپي سفالوس جدا شده از سگ هاي شهر زابل از واكنش PCR استفاده كرديم. به صورت ميانگين تعداد ۵ عدد كنه از بدن هر يك از سگ هاي آلوده كه در سطح شهر پراكنده بودند بدون توجه به سن و جنس و نژاد نمونه گيري كرده و جهت تشخيص گونه به آزمايشگاه انگل شناسي فرستاديم كه تعداد ۳۵۰ عدد كنه از كنه‌هاي گونه ريپي سفالوس جدا شده و در ظرف حاوي الكل ۷۰ درصد و در دماي ۴ درجه سانتي‌گراد قرار داده شد . پنجاهpool تهيه گرديد و در هر pool هفت كنه گذاشته شد و كنه هاي pool شده تا زمان جداسازيDNA در دماي ۴ درجه سانتيگراد نگهداري شدند . براي جداسازيDNA نمونه ها را ابتدا با آب مقطر شستشو داده و آنها را داخل rockهاي مربوط به نمونه قرار داده داديم, سپس كنه‌هاي هر نمونه به صورت جداگانه كوبيده شدند, پوسته سخت كتيني جدا گرديد و محتويات بدن كنه باقي ماند . براي جداسازي DNA از كيت تجاري مركز ملي ذخاير ژنتيكي و زيستي ايران ( Ibrc) استفاده گرديد. جهت بررسي وضعيت آلودگي به بيماري ارليشيوز، پس از ذوب نمونه DNA ابتدا pipetting انجام شد و سپس از كيت سريع PCR (Vetk كره جنوبي) استفاده گرديد . در نهايت ۳۵۰ كنه كه در مراحل مختلف بالغ و نوچه از بدن سگ ها برداشته شده بود و بر اساس بررسي مورفولوژيكي كه در آزمايشگاه انگل شناسي انجام شده بود،كنه قهوه‌اي سگ(ريپي سفالوس سنگوينوس ) تشخيص داده شدند و بر اساس نتايج استخراج DNA و آزمايش PCR به دست آمده پنج پول آنها مثبت بوده و حضور قطعه 336 bp نشانگر آلودگي به گونه اي از اجرام ارليشيايي بود . در اين مطالعه براي اولين بار حضور باكتري ارليشيا در جمعيت كنه هاي بدن سگ هاي شهرستان زابل با روش مولكولي تاييد شد. نتايج تحقيق حاضر نيز نشان داد كه ميزان آلودگي به روش مولكولي دركنه هاي بدن سگ درصد مشابهي با درصد آلودگي سگها دارد و اين روش بررسي به عنوان يك روش ساده مي تواند جايگزين مناسبي براي تعيين آلودگي حيوانات شمار بيايد .