جداسازي و شناسايي اكتينوميست دريايي تجزيه كننده نفت خام از سواحل مكران

Isolation and identification of crude oil degrading marine actinomyces from Makran shore line

آلودگي نفتي درياها يك معضل جهاني مي باشد.نفت از راههاي گوناگون وارد دريا مي شود.به طورمثال نشت نفت ناشي از عمليات اكتشاف و يا بهره برداري از دريا و انتقال نفت از محل استخراج مي تواند باعث ورود نفت به دريا شود.علاوه بر اين سوانح نفتي از قبيل انهدام تانكرهاي نفتي و قاچاق سوخت نيز از ديگر راههاي نشت نفت به محيط دريا محسوب مي شود. روش هاي گوناگوني براي حذف نفت از محيط هاي دريايي وجود دارد. امّا روش هاي زيستي جزء روش هاي مقرون به صرفه اقتصادي و پاك مي باشند. باكتري هاي تجزيه كننده نفت در سواحل مكران تا كنون به درستي مطالعه نشده اند هدف از اين تحقيق بررسي اكتينوميست هاي دريايي تجزيه كننده نفت درسواحل مكران مي باشد. براي انجام اين تحقيق ازآب و رسوب مناطق مختلف در سواحل مكران (كنارك، تيس، رمين) نمونه برداري شد . نمونه ها به مدت 10 روز در محيط بوشنل هاس با يك درصد نفت خام در دماي 30 درجه وروي شيكر انكوبه شدند. سپس دو پاساژ متوالي از نمونه ها انجام شد و در نهايت كلني ها روي محيط مارين آگار جداسازي شدند.شناسايي اكتينوميست ها ابتدا با روش هاي بيوشيميايي صورت گرفت وبعد با روش هاي مولكولي مبتني بر تكثير ژن 16s DNA تأييد شد. نتايج حاصل از اين تحقيق نشان داد كه اكتينوميست هاي دريايي در سواحل مكران از تنوع مناسبي برخوردار هستند.از مجموع 42 باكتري جمع آوري شده تعداد 16 اكتينوميست شناسايي گرديد . با انجام روش هاي غربالگري و مقايسه قابليت حذف نفت،يك سويه(P2) به عنوان اكتينوميست برتر انتخاب شداين سويه 50 درصد فعاليت امولسيون كنندگي از خود نشان دادو قادر به حذف نفت به ميزان 68% در مدت 10 روز بود. پس از شناسايي مولكولي، اين سويه در جنس استرپتومايسس قرار گرفت . با به كارگيري اكتينوميست ها ي دريايي مي توان آلودگي نفتي در سواحل نفتي و خصوصاّ مناطق ساحلي آلوده مكران را كاهش داد.

Oil pollution is a global problem in marine environment. Oil enter into this environment from different ways. For example oil spill from exploration and transportation of oil cause pollution. Also destruction of oil tankers and fuel smuggling are other pathway of oil spill in sea. There are many methods for elimination of oil from marine environment. But biological methods are economic and clean technology for remediation of oil spill. Crude oil degrading bacteria not fully studied in Makran Sea. The aim of this study is characterization of crude oil degrading actinomyces from Makran Sea. Sea water and sediment samples were inoculated into Bushnell Hass medium (BH) with 2% crude oil for ten days. Then two other passages were performed from samples. Finally the colonies were isolated in marine gar medium. Identification of actinomyces isolates were done by biochemical and molecular methods. The results of this study shown that the marine actinomyces have sufficient biodiversity in Makran shorelines. From 42 isolated bacteria 16 actinomyces were identified. After screening test and comparison of crude oil degradation ability one strain (P2) were selected as prevalent actinomyces. This strain have 50 % emulsification activity and can degraded 68% of crude oil in ten day of incubation. Molecular identification confirmed that this strain belongs to Streptomyces genus. By application of marine actinomyces oil pollution can be reduced in shore lines of Makran Sea especially in polluted area.