بررسي بافتي و مولكولي و اثر پروبيوتيك بر تومورهاي سرطاني آلوده به اشرشياكلي و كلبسيلاپنومونيه داراي ژنوتوكسين كلي باكتين

Study of histological, molecular and probiotic effect on cancerous tumors which contaminated with Escherichia coli and Klebsiella pneumoniae that they have genotoxin colibactin

يكي از مهمترين فاكتورهاي ايجاد سرطان كولوركتال، عفونت هاي باكتريايي است. بررسي ها نشان ميدهد عفونت با نوع خاصي از باكتري هاي اشرشياكلي و كلبسيلاپنمونيه در افراد مبتلا به كوليت اولسراتيو ميتواند باعث سرطان كولوركتال شود.پروبيوتيك ها، ميكروارگانيسم هاي زنده و مفيدي هستند كه در صورت مصرف در انسان يا حيوان و با اثر بر فلور ميكروبي بدن باعث بروز اثرات مفيدي بر سلامتي ميزبان ميشوند.امروزه پروبيوتيك به عنوان عاملي براي پيشگيري از ابتلا به بسياري از بيماري هاي عفوني و سرطاني شناخته شده اند. خاصيت ضد كارسينوژنيك پروبيوتيك با خنثي سازي مسموميت مواد كه باعث آسيب ژني ميگردند، صورت ميگيرد. مطالعات ميكروبيولوژي و مولكولي 30 نمونه بيوپسي افراد سالم و 30 نمونه بيوپسي از بافت تومور افراد مبتلا به سرطان كولوركتال مورد مطالعه قرار گرفت.پس از شناسايي باكتري هاي اشرشياكلي و كلبسيلاپنمونيه از بافت روده ي بزرگ و تومورهاي سرطان كولوركتال با روش هاي ميكروبي و بيوشيميايي ژنوم باكتري استخراج و به روش Multiplex PCRبراي باكتري هاي مورد نظر از لحاظ داشتن ژن هاي موجود در منطقه ي PKS استفاده ي محصول PCR بررسي شد. پروبيوتيك هاي مورد استفاده شامل جنس لاكتوباسيلوس و بيفيدوباكتريوم از شركت تك ژن دريافت شد. با روش هاي رايج ميكروبيولوژي و بيوشيميايي شناسايي و تاييد شد و از مايع رويي كشت با روش سنجش قطر هاله ي عدم رشد اثر آنها بر باكتري هاي اشرشياكلي و كلبسيلاپنمونيه مشخص شد. نتايج از 6 گونه باكتري هاي اسيدلاكتيك مورد آزمايش همه آنها توان ضدميكروبي خوبي در مقابل اشرشياكلي وكلبسيلاپنمونيه داراي ژنوتوكسين كلي باكتين نشان دادند بيشترين اثر مهاركنندگي را باسيلوس كوآگولانس عليه اشرشياكلي طي روش چاهك با ميانگين قطر هاله ي عدم رشد 3/19 ميليمتر از خود نشان داد. همچنين در مقايسه روش ديسك و چاهك روش چاهك به مراتب حساس تر از روش ديسك بود. طي اين مطالعه متابوليت هاي توليد شده توسط باكتري هاي اسيدلاكتيك توانستند از رشد باكتري هاي داراي كلي باكتين جلوگيري كنند. اين نشان دهنده نقش مثبت اين دسته از باكتري ها در سلامت انسان است.

One of the most important factors for colorectal cancer is bacterial infection. Studies show that infection with certain types of bacteria Escherichia coli and Klebsiella pneumoniae in patients with ulcerative colitis can cause colorectal cancer. Colorectal cancer is one of the most spread cancer in the world and third common cancer in Iran. Bacterial infection of gastrointestinal system is one of major risk factor of colorectal cancer beside smoking, alcohols and bad food habits. Enterobacteriaceae have a special toxin call colibactin that is a secondhand metabolite of Enterobacteriaceae Species specially in E.coli and Klebsiella so it can be effected on enterocytes and defect the cell cycle and promote inflammation and Subsequently malignancy in colon.in other side, the increasing use of probiotics products such Lactobacillus and Bifidobacterium in the last two decades as a Restoration agent of intestine normal flora, is so interesting. the aim of this study is Evaluation of anti-genotoxicity of lactic acid bacteria against bacteria that have genotoxin which isolate from colorectal cancer tumors In this study after collecting 30 mucosal tissue samples from colorectal patients, these samples were cultured in differential and special Medias and E.coli and Klebsiella Species which contain coli bactin genes, were detected. Then for detection of 6 Species of probiotics the suger fermentation test was used and after that, disk diffusion and well diffusion test were accomplished. The results of disk diffusion and well diffusion shows Lactobasillus coagulans in the first and Subsequently Lactobacillus acidophilus and Lactobacillus plantarum have a great inhibitory growth effect on E.coli and Klebsiella Species. With Attentin to Similarity of well diffusion and disk diffusion test, we conclude use of Lactobasillus family as a probiotic is useful for restoration, rectify and remission of colorectal cancer patient with gastrointestinal infection background