القاي ريشه مويين در گياه دارويي خارمريم( silybum marianum (L.) Geartn )

Hairy root induction in medicinal plant Milk thistle (silybum marianum (L.) Geartn)

خارمريم با نام علمي silybum marianum (L.) Geartn از خانواده compositae گياهي علفي يك ساله يا دوساله است. امروزه اين گياه يكي از داروهاي موثر براي محافظت از كبد و كمك كننده براي بازسازي سلول هاي كبدي است و براي درمان هپاتيت و يرقان و حالت هايي كه كبد تحت فشار است به كار مي رود]مظفريان,1394.[ در عصاره دانه خشك آن 1 الي 4 درصد سيلي مارين است. سيليبين موثرترين ماده موجود در سيلي مارين است كه به عنوان آنتي اكسيدان و محافظ كبدي شناخته شده است] فلاح حسيني و همكاران, 1383[. امروزه به دليل پيشرفت در زمينه زيست شناسي مولكولي, مقاومت برخي پاتوژن ها به دارو هاي تجاري و شيميايي فعلي, سختي ساخت شيميايي آنها ونياز به داروهاي موثر و فاقد اثرات جانبي, لزوم استفاده از مواد طبيعي با ايمني لازم, احساس ميشود. ريشه مويين تراريخت در شرايط كشت بدون هورمون بسيار پايدار بوده و توليد بالايي دارد. رشد سريع, زمان دو برابر شدن پايين, سهولت نگهداري, توانايي سنتز طيفي از تركيبات شيميايي در ريشه مويين, توانايي توليد بيش از يك متابوليت و حتي متابوليت هاي جديد نسبت به گياه مادري آنهارا به منبع مهم و دائمي براي توليد متابوليت هاي مهم و ارزشمند تبديل كرده است]حسنلو و همكاران, 1387.[ در اين تحقيق ريشه هاي مويين توسط A. rhizogenes سويه AR15834توليد شدند. تاثير دو نوع روش تلقيح (غوطه وري, تزريقي) و سه محيط(MS كامل,1/2, 1/4) بر القاي ريشه مويين و كلون سازي ريشه ها در سه محيط مايع بررسي شد. بيشترين ميزان تراريختي در روش تزريقي و محيط1/2MS (86/66 درصد) بدست آمد. بهترين محيط مايع براي كلون كردن ريشه ها محيط 1/2MS است. اثبات تراريختي ريشه هاي مويين به وسيله PCR با استفاده از آغازگرهاي اختصاصي rol C و vir D انجام شد.

Milk thistle (silybum marianum (L.) Geartn) belong to family compositae is a grassy and one or two years old plant. Today this plant is one of an effective medicine for preserve of liver and helpful for rehabilitation of liver cells. [mozafarian,1394] In its carious seeds extract there is 1 to 4 percent of silymarin. The most effective substance of silybin is silymarin that is known as the antioxidant and liver protective [falah hoseini et al.,1394]. Today because of the improvement in molecular biology, resistance of some pathogens to chemical medicines, difficulty of chemically producing, and need of effective medicine without side effects, the necessity of use the natural materials is felt. Transgenic hairy roots in the free-hormone medium are very stable and have a high production. Fast growth, low double time, facile conserving, ability to synthesis a vast spectrum of chemical compounds in hairy roots have converted them to an important and permanent source for production of important medicinal metabolites. [hasanloo et al.,1387] In this research transgenic hairy root induction was established through Agrobacterium rhizogenes strain AR15834. The effect of tow method of co-culture (inversion, injection) and three type culture (full,1/2,1/4 MS) on induction of hairy root were investigated. Maximum transformation was in injection method and 1/2MS medium(86.66%). Hairy root were confirmed by PCR using rol C and vir D gene-specific primers.