بهينه سازي شرايط كشت Bacillus safensis محرك رشد گياه با استفاده از روش رويه سطح پاسخ

ريزوباكتري هاي محرك رشد گياه (PGPR)، باكتري هاي مفيد مرتبط با گياه هستند كه در محدوده اي از خاك كه ريشه گياهان را احاطه كرده است، مستقر مي شوند. به دليل آزاد سازي مقادير زيادي از ترشحات و ته نشست هاي ريشه اي، تراكم جمعيت و فعاليت آنها در ريزوسفر در مقايسه با ديگر مناطق خاك بيشتر است. PGPR ها رشد و سلامت گياهان را از طريق مكانيسم هاي متعددي حمايت و/يا تحريك مي كنند. بنابراين بهبود كشت پذيري اين ريزواره هاي ريزوسفري تحت شرايط آزمايشگاهي در تجاري سازي و استفاده وسيع آنها بجاي كود هاي شيميائي در زمينهاي كشاورزي مفيد خواهد بود. در اين مطالعه روش رويه سطح پاسخ براي سنجش تاثيرات متغير هاي pH ابتدائي، دما و غلظت هاي عصاره گياه اسپندك بر روي رشد يك سويه Bacillus safensis محرك رشد، جداسازي شده از ريزوسفر گياه اسپندك، بكار گرفته شد. هر متغير در سه سطح به شرح زير نشان داده شد: دما ( 20، 30 و 40 درجه سانتي گراد)؛ pH (4، 6 و 8)و عصاره ريشه (0، 5/2 و 5 درصد). آزمايش هاي طراحي شده در ارلن ماير حاوي 20 ميلي ليتر محيط كشت استريل Luria-Bertani (LB) انجام شد كه به هر كدام سويه باكتريايي (با OD اوليه 1/0) تلقيح شد. تمام ارلن هاي آزمايش در شيكر با 150دور در دقيقه به مدت 24 ساعت قرار گرفتند. در فاصله هاي زماني معين 1 ميلي ليتر نمونه برداشته شد و ديناميك رشد باكتريايي با سنجش چگالي نوري با استفاده از اسپكتروفوتومتر در طول موج 600 نانومتر مورد بررسي قرار گرفت. در ساعات اوليه ي پايش، تركيب پارامتري بهينه براي رشد (4) pH، دماي 40 درجه سانتي گراد و عصاره ريشه ي 5 درصد بود. مقايسه نتايج ميزان رشد در ساعات پاياني نشان داد كه در شرايط رشد بهينه، ميزان pH تركيب ذكر شده از 4 به 8 تغيير يافت. به طور كلي نتايج به دست آمده نشان داد كه هر سه عامل به طور قابل توجهي رشد باكتريايي را تحت تاثير قرار مي دهند.