شماره ركورد كنفرانس :
4357
عنوان مقاله :
بهينه سازي كشت نسل اول گياهان توتون ترانسپلاستوميك بيان كننده ذرات PHB و پروتئين crtPA
پديدآورندگان :
محمدين فرزانه f2.mohammadin@gmail.com دانشگاه تربيت مدرس، تهران , جلالي جواران مختار دانشگاه تربيت مدرس، تهران , حفيظي اكرم دانشگاه تربيت مدرس، تهران , رستمي مهناز دانشگاه تربيت مدرس، تهران
كليدواژه :
زراعت مولكولي , ترانس پلاستوميك , كلروفيل , توتون , پلي هيدروكسي بوتيرات
عنوان كنفرانس :
1st interntional congress on biotechnology of medicinal plants and mushrooms
چكيده فارسي :
گياهان ترانسپلاستوميك، سيستمي كارا براي توليد پروتئينهاي نوتركيب در زراعت مولكولي ميباشد. تراريختي كلروپلاست علاوه بر مزاياي متعدد، به دليل پلي پلوئيد بودن سبب افزايش بيان پروتئين هاي نوتركيب مي گردد. استفاده از ذرات پليهيدروكسيبوتيرات (PHB) نيزعلاوه بر جلوگيري از تشكيل اجسام مجتمع سبب معرفي روشي كم هزينه جهت كمك به تاخوردن مستقل و تخليص ارزان پروتئين نوتركيب crtPA از گياه توتون شده است. به دليل كلروز شديد برگ گياهان ترانسپلاستوميك در مقايسه با شاهد و به منظور بهينه سازي شرايط رشدي آن، كشت بذر گياهان غير تراريخته يا شاهد ((WT و نسل اول گياهان ترانسپلاستوميك بيان كننده ذرات PHB و crtPA در شرايط كشت درون شيشه اي حاوي ساكارز 1 تا 3% و شرايط نوري روز بلند، روز كوتاه و نور ثابت انجام شد. نتايج فيزيولوژيكي نشان داد كه رشد گياهان تراريخت در محيط كشت حاوي ساكارز 3% و نور ثابت بهتر مي باشد. اندازه گيري محتواي كلروفيل a، b و كل در برگ جوان، توسعه يافته و پير گياهان تراريخته در مقايسه با شاهد با استفاده از روش اسپكتروفوتومتري نيز نشان دهنده توليد و سپس تجزيه كلروفيل در طي رشد و توليد پروتئين هاي مي باشد. بررسي بيان چندين ژن مورد نظر در مسير تبديل كلروفيل در گياهان شاهد و تراريخته با استفاده از روش نيمهكمي RT-PCR در مطالعات بعدي، ما را در بهبود افزايش سطح بيان و تخليص ارزان پروتئينهاي نوتركيب دارنده اتصال هاي دي سولفيدي از كلروپلاست، كمك خواهد نمود.