معرفي يك روش فيزيكي (الكتروفورز) به منظور استخراج ژن از ژل آگارز و آزمايش همسانه-سازي ژن خالص سازي شده حاصل از اين روش.

به منظور كلون كردن ژن، ابتدا بايد ژن مورد نظر از ساير آلودگي ها (پروتئين، باندهاي غيرتخصصي و پرايمردايمرها و ...) جدا شود و سپس از اين ژن خالص سازي شده جهت نوتركيبي پلاسميد باكتري E.coli استفاده شود. تابه حال از روش هاي شيميايي و فيزيكي مختلفي براي خالص سازي ژن موردنظر از ساير آلودگي هاي ژني استفاده مي شد، اما در اين مقاله سعي شده است از يك روش فيزيكي جديد با استفاده از خالص سازي ژن توسط ميدان الكتريكي درون مايع TAE.1X استفاده شود. با توجه به اينكه قابليت اتصال ژن خالص سازي شده به پلاسميد باكتريايي، به منظور نوتركيبي پلاسميد و كلون كردن ژن موردنظر، تا حد زيادي به حلال ژن بستگي دارد و اينكه تابه حال در روش-هاي معمول شيميايي از آب دوبار تقطير جهت حل كردن ژن خالص سازي شده از ژل آگارز استفاده مي شد اما در اين روش براي حل كردن ژن خالص سازي شده از ژل آگارز، به جاي آب دو بار تقطير از TAE.1X استفاده شده است. در اين تحقيق اتصال ژن خالص سازي شده به پلاسميد و همچنين قابليت كلون كردن اين ژن توسط باكتري E.coli سويه DH5α مورد آزمايش قرار گرفت. در اين پژوهش از تكثير ژن FJ755158.1( PqHMGR) توسط واكنش زنجيره اي پليمراز با استفاده از آغازگرهاي طراحي شده از توالي هاي cDNA مربوط به HMG-COA ردوكتاز از گياه جنسينگ (Panax quinquefolius) استفاده شد. در نهايت ژن PqHMGR توسط دستگاه و روش مذكور به خوبي خالص سازي شد و همچنين توسط باكتري E.coli سويه DH5α به درستي كلون شد. پلاسميد نوتركيب كلون شده، به منظور تائيد موفق بودن همسانه سازي و همچنين توالي يابي به شركت Bioneer ارسال شد. اين وسيله در مركز مالكيت هاي معنوي با شماره اظهارنامه: 139550140003000025 و رمز: 22396 ثبت اختراع شدها ست.