شناسايي مولكولي ژن بتالاكتاماز TEM در ايزوله هاي باليني كلبسيلا پنومونيه جدا شده از شهر اراك با روش Multiplex-PCR

يكــي از انــواع آنزيــم هايــي كــه توســط برخــي گونــه هــاي باكتــري هــاي گــرم منفــي ايجــاد مــي شــوند بتالاكتامازهــاي وســيع الطيــف1 (ESBL) مــي باشــند. آنهــا در گونــه هــاي كلبســيلا و ديگــر باســيل هــاي گــرم منفــي يافــت شــده انــد و بــه نظــر مــي رســد نقــش مهمــي در مكانيســم مقاومــت در برابــر آنتــي بيوتيــك هــاي بتالاكتــام دارنــد. از جملــه ژنهــاي مهــم توليــد كننــده بتالاكتامازهــاي وســيع الطيــف ژن TEM مــي باشــد. ايــن پژوهــش بــه منظــور بررســي ژن blaTEM در كلبســيلا پنومونيــه جــدا شــده از بيمــاران در مراكــز منتخــب اراك بــوده اســت. ايــن مطالعــه بــه مــدت 6 مــاه بــه طــول انجاميــد و روي نمونــه هــاي كلينيكــي جمــع آوري شــده از بخــش هــاي مختلــف مراكــز منتخــب اراك انجــام گرفــت. باكتــري هــاي توليــد كننــده بتالاكتامازهــاي وســيع الطيــف بــا روش هــاي ميكروبيولوژيــك مشــخص شــدند. ســويه هــاي اســتفاده شــده در ايــن پژوهــش تعــداد 112 نمونــه كلبســيلا پنومونيــه بــود. محتــوي DNA تمــام ايزولــه هــاي توســط كيــت تخليــص DNA اســتخراج شــدند. مجمــوع DNA اســتخراج شــده بــا اســتفاده از پرايمرهــاي اختصاصــي بــراي ژن TEM بــا روش Multiplex-PCR مــورد بررســي قــرار گرفتنــد. محصــولات PCR بــر روي ژل آگارز 1/5 درصــد الكتروفــورز و بــا اســتفاده از اتيديــوم برومايــد مشــخص شــدند. از 112 نمونــه كلبســيلا پنومونيــه جــدا شــده 15 نمونــه حــاوي بتالاكتامازهــا توليــد شــده توســط ژن TEM و بــراي بررســي 5 نمونــه كنتــرل منفــي نيــز در نظــر گرفتــه شــد. مطالعــه حاضــر نشــان داد كــه ژنTEM بــه عنــوان ژن غالــب مطــرح شــده اســت. در ايــن مطالعــه بــر اهميــت بــالاي ظهــور بتالاكتامازهــاي وســيع الطيــف در ايــران تاكيــد شــده اســت كــه در صورتــي كــه ايــن رونــد ادامــه پيــدا كنــد هشــداري اســت نســبت بــه فقــدان سياســت هــاي دارويــي دولــت در زمينــه اســتفاده از مــواد دارويــي بــدون توجــه بــه الگــوي صحيــح مصــرف آن. ايــن مطالعــه همچنيــن روش Multiplex-PCR را بــه عنــوان يــك روش نســبتا آســان و ســاده جايگزيــن بــراي نوعــي تبعيــض بيــن گونــه هــاي ESBL مثبــت كلبســيلا پنومونيــه معرفــي مــي كنــد.