مقايسه دو روش PCR مستقيم و PCR با استفاده از DNA استخراج شده توسط كيت در تعيين ژنهاي tst و mec A در باكتري استافيلوكوك اورئوس

PCR يكــي از دقيــق تريــن و حساســترين تســت هــا بــراي ســنجش مولكولــي مــي باشــد. اســتخراج DNA هميشــه از وقــت گيرتريــن مراحــل قبــل از PCR بــوده كــه بــا حــذف آن در برخــي شــرايط مــي تــوان در زمــان و هزينــه صرفــه جويــي كــرد. هــدف از ايــن مطالعــه مقايســه دو روشPCR مســتقيم و بــا اســتخراج DNA الگــو در شناســايي ژن هــاي femA mecA tst ميباشــد. در ايــن بررســي ايزولــه هــاي بالينــي اســتافيلوكوك اورئــوس بــا تســت هــاي بيوشــيميايي تاييــد شــدند. ســپس بــا روش هــاي PCR مســتقيم از كلنــي هــاي اســتافيلوكوك كشــت داده شــده بــر روي محيــط مولــر هينتــون PCR بــا DNA اســتخراج شــده توســط كيــت بــراي ژنهــاي tst. mecA.femA مــورد ارزيابــي قــرار گرفــت. بــراي ايــن كار از ســه پرايمــر اختصاصــي اســتفاده شــد. تكثيــر ژنهــاي tst وmec A بــه طــول 326و bp163 توســط PCR مســتقيم و بــا DNA اســتخراج شــده بــا موفقيــت انجــام شــد كــه مربــوط بــه توكســين ســندرم شــوك توكســيك و مقاومــت بــه متــي ســيلين مــي باشــند. در نهايــت توســط ژنهــاي مــورد نظــر ســويه هــاي مقــاوم و توليــد كننــده توكســين شناســايي شــدند. نتايــج بدســت آمــده از نظــر كيفــي متفــاوت بودنــد، كــه آزمــون PCR بــا اســتفاده از كيــت نتايــج بدســت آمــده داراي كيفيــت بهتــري بــود. بــا توجــه بــه نتايــج بدســت آمــده ، بــراي صرفــه جويــي در وقــت و هزينــه در تشــخيص اســتافيلوكوك اورئــوس مــي تــوان از PCR مســتقيم اســتفاده كــرد. كيفيــت باندهــاي بدســت آمــده در ايــن روش نســبت بــه PCR بــا DNA اســتخراج شــده، قابــل قبــول بــود و در برخــي مــوارد مــي تــوان از آن بــه عنــوان يــك تســت تشــخيصي ســريع اســتفاده كــرد.