توصيف يك روش مناسب جهت بررسي بيان ژن هاي تهاجمي (stx) اشرشياكلي O157:H7 در محيط گوشت چرخ شده طي نگهداري در شرايط يخچالي

اجزاء غذايي و نيز پيچيدگي بافت غذا از فاكتورهاي ممانعت كننده جهت مطالعات بيان ژن بطور مستقيم از بافت غذا مي باشد. مكانيزم بيماريزايي شيگاتوكسين ها به درستي شناخته نشده است ولي مشكلات بررسي بيان ژن در بافت غذا و انجام بسياري از مطالعات در محيط براث يا مدل هاي غذايي شبيه براث يكي از مشكلات در بررسي بيماريزايي باكتري ها مي باشد. هدف از اين مطالعه تثبيت و توصيف يك روش ساده براي استخراج RNA از باكتري اشرشياكلي O157:H7 در محيط گوشت چرخ شده و همچنين بررسي بيان ژن هاي تهاجمي درگير در ساخت شيگاتوكسين (stx) اين باكتري در محيط مزبور و توسط روش RT-PCR مي باشد. نمونه هاي گوشت چرخ شده تلقيح شده توسط اشرشياكلي O157:H7 به مدت ۷ روز در دماي يخچالي (C◦ ۴±۱) قرار گرفته و RNA باكتري مظابق روش توصيف شده در مقاله و با استفاده از تجهيزات ساده در دماي محيط (C◦۲۵) و در روزهاي ۰، ۲، ۵ و ۷ بعداز نگهداري در شرايط يخچال استخراج شد. نتايج نشان داد كه دماي يخچالي باعث كاهش بيان ژن stx1A (۳۵/۳- برابر در روز ۷) و stx2A (۹/۲- برابر در روز ۷) در گوشت چرخ شده مي گردد. در اين مطالعه روشي براي استخراج RNA باكتري با حداقل امكانات و نيز حداقل مداخله از بافت غذا ارزيابي و تأييد شد. نتايج نشان داد كه روش Real-time RT-PCR كمي مي تواند به عنوان يك روش حساس و قابل اعتماد در مطالعات بيان ژن مورد استفاده قرار گيرد.