جداسازي و مطالعه سويه هاي مخمر ها عامل بيماري شانكر باكتريايي درختان هسته دار در استان فارس

Canker of stone fruit trees incited by Cryptococcus adeliensis in northern Fars

شانكر و انگومك باكتريايي، عمدتا به درختان ميوه هسته¬دار صدمه مي¬زنند و در اكثر مناطق زير كشت درختان ميوه هسته¬دار وجود دارند. مشخص¬ترين نشانه¬هاي بيماري، ايجاد شانكر همراه با تراوش انگومك است. به منظور بررسي شناسايي ميكروارگانيسم¬هاي دخيل در شانكر درختان ميوه هسته¬دار نمونه برداري از باغات شمال فارس در بهار 1394 انجام گرديد. ساقه¬هاي آلوده با آب شسته شد. قطعاتي از پوست ساقه داراي علايم در آب مقطر استريل در ظرف پتري با تيغ خرد گرديد. پس از 20 دقيقه نگه¬داري در دماي اتاق، چند لوپ از سوسپانسيون بدست آمده در سطح محيط آگار غذايي حاوي دو درصد سوكروز مخطط گرديدبعد از چند روز نگه داري در دماي اتاق كلني¬هاي سفيد مخمر مانند در سطح محيط رشد كردند.سوسپانسيون از كلوني¬ها تهيه و به زير پوست ساقه تزريق گرديد بعد از 7 تا 10 روز علايم بيماري ظاهر شد. جدايه¬هاي مايه زني شده دوباره از ساقه¬هاي الوده جداسازي گرديد.شناسايي مولكولي با تكثير بخشي از ژن D1/D2 انجام و قطعه توالي¬يابي شده توالي¬هاي بدست آمده با استفاده از نرم افزار بلاست در ژن بانك با تولي¬هاي موجود در اين پايگاه مقايسه و ميزان شباهت تعيين گرديد. توالي مورد نظر با PCR حدود bp 600 تكثير شد. با مقايسه در ژن بانك جدايه مورد نظر بيشترين شباهت را به Cryptococcus adeliensis نشان دادند. جدايه¬ها داراي كلوني¬هاي كرم تا صورتي كمرنگ و سلول-هاي كروي مي¬باشد. جدايه¬ها داراي كاتالاز مثبت، اوره¬آز مثبت، اكسيداز منفي، قادر به هيدروليز ژلاتين ، اسكولين و آربوتين مثبت ولي منفي در ذوب زلاتين بودند.

Canker of stone fruit trees is among the most damaging disease throughout the world and in many fruit growing areas of Iran. The prominent symptoms of the disease ane formation of brown depressed canker at the base of spurs. On twigs and small and scaffold branches of the effected trees. To isolate and identify the causal agent in fruit tree orchards of Abadeh. Samples of efected twigs and branches were collected in the growing so as ones of 2016-2017 symptometic twigs and branches were washed under tap water , and piecesof the bank tissues bearing canker were teased upant in drops of distilled water in petri plates. Loopfuls of the suspensions were streaked on to plates of nutrient agar amended with 2% sucrose (SNA) and the plates were incubated ac 250C . Pinkish-whito circular colonies appeared on the medium after 3-5 days. Pathogencity of the isolates were confirmed by injection of suspensions under the bank of one-year-old seedlings of plum and peach. A fragment 600bp long of the rDNA was amplified by PCR using D1/D2 primer. The amplicon was sequenced and it sequence compared with those deposited in GenBank. The sequences were highly similar (99%) to those of Cryptococcus adeliensis . Branch canker incited by Pseadomonas syringae pv. Syringae has previously been reported from Fars province. This is the first report on the occurrence of yeast canker caused by C. adeliensis in northern Fars.