جداسازي و شناسايي سلول هاي بنيادي خونساز + CD117 از مغز استخوان رت

سلول هاي بنيادي خونساز گروهي از سلول هاي ناهمگن با ويژگي خودنوسازي، قابليت تمايز و پتانسيل بازسازي هستند. گروهي از اين سلول ها، سلول هايي هستند كه نشانگر سطح سلولي CD117 را بيان مي كنند و اصطلاحاً سلول هاي C-Kit+ نيز نام دارند. مطالعات مختلف نشان داده اند كه حضور اين سلول ها براي عملكرد سلول هاي بنيادي خونساز مورد نياز و ضروري است به طوريكه جهش هايي كه منجر به فعاليت زياد و عدم فعاليت اين سلول ها و گيرنده هاي سطح سلولي اين سلول ها مي شود به شدت بر عملكرد سلول هاي بنيادي خونساز تأثيرگذار هستند. به همين منظور و با توجه به اهميت نقش اين سلول ها در خونسازي هدف از اين مطالعه بررسي پروتوكل جداسازي اين سلول ها با روش MACS و شناسايي اين سلول ها با روش FACS مي باشد. به اين منظور، پس از معدوم كردن موش هاي رت نژاد رتوس، استخوان هاي فمور و تيبيا جدا و به آزمايشگاه كشت سلولي منتقل شد. در مرحله اول محتويات مغز استخوان فلاشينگ شد، در مرحله دوم سلول هاي تك هسته اي با روش فايكول هايپك جمع آوري شد و در مرحله آخر سلول هاي CD117+ با روش MACS جداسازي شد. جهت تأييد سلول هاي جدا شده ميزان بيان نشانگر سطح سلولي CD117+ با روش فلوسايتومتري اندازه گيري شد. نتايج حاصل از جداسازي سلول هاي CD117+ نشان داد كه 90 درصد سلول هاي جدا شده از سلول هاي تك هسته اي مغز استخوان، نشانگر CD117+ را بيان مي كنند. اين مطالعه نشان مي دهد كه سلول هاي CD117+ به راحتي قابل جداسازي، شناسايي و ذخيره سازي جهت انجام مطالعات آزمايشگاهي هستند.