همسانه سازي مولكولي، شناسايي و بررسي بيان ژن GTPCHI تحت تنش شوري از انگور عسكري

Molecular cloning, identification and expression analysis of GTPCHI gene under salt stress from Grape (Vitis vinifera L. cv. Askari)

GTPIسيكلوهيدرولاز از طريق مجموعه اي از واكنش ها، تبديل GTP به دي هيدرونئوپترين تريفسفات و فوماريك اسيد را كاتاليز مي كند. اين واكنش اولين مرحله در بيوسنتز تتراهيدروفولات FH4در گياهان و ميكروارگانيسم هاي مشخص و تتراهيدروبيوپترين BH4 در پستانداران مي باشد. توالي cDNA كامل كدكننده GTP سيكلو هيدرولازI تحت عنوان VvGTPCHI از بافت حبه انگور عسكري Vitis vinifera L. cv. Askari( با استفاده از تكنيك واكنش زنجيره- اي پليمراز نسخه برداري معكوس RT-PCRجداسازي همسانه سازي شد.توالي نوكلئوتيدي شامل 1338 نوكلئوتيد مي باشد كه پروتئيني با 445 آمينواسيد را كد مي كند. پروتئين كد شده داراي وزن مولكولي 48/74 كيلو دالتون و نقطه ايزوالكتريك 6/75 مي باشد. بررسي بيان اين ژن به روش RT-PCR نيمه كمي نشان داد كه اين ژن در تمام بافت هاي گياهي بيان شده و همچنين تحت تنش شوري با كاهش بيان مواجه گرديد

GTP cyclohydrolase I (GCH, EC 3.5.4.16) catalyzes the conversion of GTP to dihydroneopterin triphosphate and formic acid through a complex series of reactions. This reaction is the first committed step in the biosynthesis of tetrahydrofolate (FH4) in plants and certain microorganisms, and tetrahydrobiopterin (BH4) in mammals. A full-length cDNA encoding for GTP cyclohydrolase I, designed VvGTPCHI, was isolated and cloned from grape (Vitis vinifera L. cv. Askari) berry tissue by reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR) technique. The cDNA was 1338 nucleotides in length with a deduced amino acid of 445 residues. The calculated molecular mass and the predicted isoelectric point of the deduced polypeptide are 48.74 kDa and 6.75, respectively. The semi-quantitative RT-PCR analysis of gene expression demonstrated that this gene was expressed in all plant tissues and also decreased under salt stress