جداسازي و تعيين خصوصيت ژن هاي CaMBP وCytochrome P 450 پاسخ دهنده به تنش شوري در گياه اسطوخودوس

Of genes Cytochrome P450 and CaMBP response to isolation and characterization salt stress in lavandula angustifolia L.

اسطوخودوس گياهي دارويي و معطر متعلق به خانواده نعناع است.تركيبات فراري كه در ماده مؤثره اسطوخودوس بيشترين اهميت را دارند به ميزان زيادي از محيطي كه گياه در آن توسعه يافته تأثير مي پذيرند.در اين تحقيق تكنيك cDNA-AFLP براي شناسايي برخي از ژن هاي افتراقي پاسخ دهنده به تنش شوري در گياه اسطوخودوس به كار گرفته شد.اسطوخودوس دربستر پرليت كوكوپيت 2:1 در سه تكرار كشت گرديد. تيمار شوري با غلظت هاي صفر، 25 و 50 ميلي مولار ازNaCl اعمال شد. نمونه برداري براي استخراج RNA با استفاده از روش بيوزول صورت گرفت. پس از استخراج RNA كل mRNA، تخليص شد. از روي mRNA جدا شده رشته اول و دوم cDNA ساخته شد cDNA دو رشته اي با استفاده از آنزيم هاي TaqIوPstI مورد هضم قرار گرفت و پس از اتصال آداپتور به آنها قطعات تكثير شدند.پس ازجداسازي باندهاي داراي بيان افتراقي از روي ژل اكريلاميد،در باكتري E.Coli همسانه سازي و سپس توالي يابي شدند. با استفاده از نرم افزارBlastX تعيين و خصوصيت ژن ها صورت گرفت. ژن هاي جداسازي شده در گروه هايي شامل ژنهاي انتقال سيگنال، ژن هاي پاسخ دفاعي و ژن هاي سوخت و ساز سلولي تقسيم بندي شدند

Lavender medicinal and aromatic plants belong to the mint family. The volatile compounds that are most important in Lavender essential oil, are greatly influenced by environment of the developing plants. In this study, cDNA-AFLP technique was used for the detection of gene with differential expression to salt stress in lavender. Lavender was planted in Perlite and Cocopeat (1:2) in three replications. Salinity treatments were applied with concentrations comprising 0, 25 and 50 mM NaCl. RNA extraction was carried out by using Biozol. After extraction of total RNA, mRNA was purified. First and second strand cDNA were synthesized from isolated mRNA. The double-strand cDNA were digested using TaqI and PstI enzymes and then were amplified after adaptor ligation to the fragments. Differential expression of the bands isolated from Acrylamide gel were cloned in E. Coli bacteria and then sequenced. Gene characterization was performed using soft ware such as Blast X. In light of the results it appears that Separated genes were classified to the groups including signal transduction genes, immune response genes and cellular metabolism genes