بررسي فعاليت آنزيم ال _آسپارژيناز در ايزوله هاي اكتينوميسيتي جداشده از رسوبات جزر و مدي و عمقي سواحل هرمزگان و بهينه سازي شرايط توليد آنزيم در فعال ترين ايزوله

محيط هاي دريايي منابع غني براي جداسازي متابوليت هاي ثانويه فعال از ميكروارگانيسم ها هستند. اين ميكروارگانيسم ها قادر به توليد آنزيم هاي ال- آسپاراژيناز، كاتالاز، كيتيناز و اورئاز مي باشند. در اين تحقيق نمونه هاي مختلفي از رسوبات مناطق بين جزر و مدي و عمقي استان هرمزگان (جزاير هنگام ، لارك و سواحل بندرعباس) نمونه برداري شد. حدود 19 ايزوله اكتينوميستي از رسوبات جداسازي و خالص سازي گرديد. شناسايي مولكولي ايزوله ها با استفاده از ژن S rDNA16صورت پذيرفت. فعاليت آنزيم ال_آسپارژيناز در ايزوله هاي جداسازي شده با استفاده از آزمون كمي نسلرز مورد سنجش قرار گرفت. شرايط رشد و ميزان توليد آنزيم ال_آسپارژيناز در فعال ترين ايزوله با انتخاب بهترين منابع كربني، نيتروژني و ph بهينه سازي گرديد. تخليص جزئي آنزيم به كمك كيسه دياليز و متاثر از غلظت هاي مختلف آمونيوم سولفات صورت گرفت. همچنين ميزان غلظت پروتئين به كمك روش برادفورد مورد سنجش قرار گرفت. نتايج سنجش ظرفيت توليد آنزيم ال_آسپارژيناز ايزوله هاي اكتينوميستي جداسازي شده نشان مي دهند كه ايزوله ي 15AV با 01/0± 5/377 ميلي مولار بيشترين قدرت توليد و ايزوله ي َ7AV با 034/0± 15/47 ميلي مولار كمترين قدرت توليد را دارا هستند. نتايج حاصل از رسوب دهي پروتئين تام محلول رويي كشت سيزده روز سويه 15AV با استفاده از غلظت هاي مختلف آمونيوم سولفات نشان مي دهد كه بيشترين غلظت پروتئين بدست آمده در 45 و 55 درصد آمونيوم سولفات اشباع مي باشد ( μg/ml 4/20). بيشترين فعاليت آنزيم ال_آسپارژيناز مربوط به عصاره خام بوده است (U/ml 49/39). عصاره خام داراي بيشترين فعاليت آنزيمي ويژه (U/ml 4/2) مي باشد.