اثر نانوذرات مغناطيسي آهن بر بيان پروتئينP53 در بافت كليه موش سوري نر نژاد Balb/c با رنگ آميزي ايمنوهيستوشيمي

وجود پروتئين p53 در ارگانيسم هاي پر سلولي حياتي بوده و تنظيم كننده سيكل سلولي است و عملكرد آن به عنوان سركوبگر تومور به معناي جلوگيري كننده از بروز سرطان مي باشد. از p53 به عنوان محافظ ژنوم يا رئيس ديده بان هاي ژنوم نامبرده مي شود كه همگي آنها بيانگر نقش حفاظتي آن در جلوگيري از موتاسيون هاي ژنوم مي باشد. نانوذرات مغناطيسي آهن داراي خواص فيزيكوشيميايي منحصر به فردي مي باشند كه امروزه استفاده هاي زيادي در پزشكي مي شود. هدف از اين مطالعه بررسي اثر اين نانوذرات بر روي بيان پروتئين P53در بافت كليه بوده است. موش‏هاي سوري نر نژاد Balb/c از انيستيتو پاستور ايران تهيه گرديد. موش‏ها حدود دو ماه سن و 25 الي 35 گرم وزن تقريبي داشتند. محل نگهداري نمونه ها، حيوانخانه دانشگاه آزاد اسلامي واحد دامغان بود كه داراي شرايط استاندارد، چرخه روشنايي و تاريكي 12 ساعته، دماي نسبي 2 ± 23 درجه سانتي گراد و رطوبت نسبي 60 تا 40 نگهداري شدند. روزانه غذا و شيشه هاي آب آنها كنترل گرديد. موش ها به سه گروه هشت تايي تقسيم شدند: گروه 1 يا كنترل: فاقد دريافت نانوذرات مغناطيسي آهن، گروه 2: دريافت كننده 100 ppm نانوذرات مغناطيسي آهن و گروه 3: دريافت كننده 300 ppm نانوذرات مغناطيسي آهن. در اين تحقيق، از پودر نانوذرات مغناطيسي آهن به قطر 20 نانومتر كه از شركت پيشگامان نانو (مشهد- ايران) خريداري شده بود، استفاده گرديد. پس از اتمام دوره 8 روزه حيوانات تشريح شدند و كليه ها از بدن خارج ‏گرديد و داخل فرمالين 4 درصد قرار گرفت. در مرحله بعد قلب را از بدن حيوان خارج كرده و درون فرمالين قرار مي‏دهيم. در مرحله بعد نمونه ها پس از گذراندن دوره 48 ساعته درون فرمالين 10 درصد جهت رنگ‏آميزي ايمنوهيستوشيمي آماده شدند. جهت تعيين ميزان بيان پروتئين p53 در بافت كليه از رنگ آميزي اختصاصي ايمنوهيستوشيمي (روش آويدين-بيوتين) انجام شد. پس از از رنگ‏آميزي ايمنوهيستوشيمي، مقاطع توسط ميكروسكوپ نوري دوربين دار، عكسبرداري شد و سلول هاي رنگ آميزي شده در هر مقطع شمارش شدند. داده ها توسط نرم افزار SPSS 17 و آزمون هاي آماري T-test، ANOVA و توكي آناليز شد. نتايج نشان داد كه نانوذرات اكسيد آهن با نفوذ به بافت كليه و ايجاد پاسخ التهابي توانستند باعث افزايش پروتئين P53 گردند. نتايج اين تحقيق نشان مي دهد كه نانوذرات اكسيد آهن در غلظت هاي بالا اثرات فزاينده اي بر بيان پروتئين P53 در بافت كليه دارد و مي توانند باعث ايجاد پاسخ التهابي در سلول شوند.