تراريختي گياه سيب زميني جهت مقاومت به ويروس PVY با استفاده از مكانيسم RNAi

استفاده از مكانيسم هاي ايجاد مقاومت ناشي از پاتوژن افق هاي جديدي در راستاي توليد گياهان تراريخت مقاوم به ويروس باز كرده است. اين نوع مقاومت ناشي از ويروس در گياهان تراريخت از طريق بيان بخشي از ژنوم خود ويروس ايجاد مي شود. يكي از بيماري هاي مهمي كه سالانه خسارت هاي اقتصادي بسياري به كشاورزان كشور وارد مي كند و باعث افت عملكرد و كيفيت محصول مي گردد، ويروسY سيب زميني است. اين پژوهش در راستاي توليد سيب زميني تراريخت مقاوم به ويروس PVY با استفاده از مكانيسم خاموشي ژن انجام گرديد. بدين منظور يك سازه ژني برگرفته از بخش 3′UTR و پروتئين پوششي (cp) ژنوم ويروس PVY طراحي گرديد. سازه با استفاده از اگروباكتريوم به ريز نمونه هاي ميانگره، برگ و ريزغده انتقال داده شدند. درصد نو ساقه هاي توليد شده در محيط باززايي بانشانگر انتخابي علف كش فسفينوتريسين (PPT) پس از رشد و تكثير مورد ارزيابي قرار گرفتند. تراريختي بوته ها با استفاده از آزمون زنجيره اي پليمراز(PCR) بررسي گرديد. بر اساس نتايج PCR ا40 درصد گياهان باززا شده تراريخت بودند. پس از رسيدن به حداكثر رشد رويشي استخراج RNA انجام گرديد. بيان ژن barدر گياهان تراريخت با استفاده از آزمون RT-PCR مورد بررسي قرار گرفت. 20 گياه تراريخت واجد سازه RNAi به منظور ارزيابي مقاومت به PVYبا آزمون اليزا مورد ارزيابي قرارخواهند گرفت.