كلون ، بيان و خالص سازي پروتئين نوتركيب انساني IGF-I در باكتري/شريشيا كلي

فاكتور رشد انسولين مانند انساني (hIGF-I) يك پلي پپتيد با وزن مولكولي 7649 دالتون است. نقش اصلي اين پروتئين در رشد، تكثير و تمايز سلول است باكتري اشريشيا كلي به دليل كاربرد آسان، رشد سريع و نياز به محيط كشت ارزان براي رشد، اغلب به منظور توليد پروتئينهاي نوتركيب استفاده مي شود. در اين تحقيق، ژن hIGF-I در سيستم بياني pET15b كلون و بصورت انكلوژن بادي در سيتوپلاسم دو سويهي باكتري اشريشياكلي (OrigamiB و (DE3) BL21) بيان شد. مقايسه ميزان بيان در دو سويهي مورد نظر نشان داد كه ميزان پروتئين hIGF-I در سويهي OrigamiB مناسب تر و در حدود 35% است. به منظور خالص سازي مطلوب پروتئين hIGF-I، توليد پروتئين در شرايط بهينه براي دستيابي به بالاترين ميزان پروتئين نوتركيب در كشت غيرمداوم انجام شد و خالص سازي پروتئين به طور موفقيت آميز توسط ستون ژل فيلتراسيون صورت گرفت.