توليد كلزاي تراريخت شده با ژن dabb1به منظور ايجاد مقاومت عليه بيماريهاي قارچي

پروتئين Dabb1 پروتئيني با ويژگي ضدقارچي از گياه آرابيدوپسيس است كه به تازگي شناسايي شده و فعاليت ضدقارچي آن در پروكاريوت موردبررسي و تاييد قرار گرفته است. هدف اين تحقيق انتقال ژن اين پروتئين به گياه كلزاو تاييد حضور ژن در گياهان تراريخت است. بدين منظور قطعه ژني مورد نظر از وكتور pJET-DAB جداسازي ، استخراج و دروكتور بياني pBI121 ساب كلون گرديد. نتايج كلونينگ توسط الگوي PCR و هضم آنزيمي تاييد شد. سپس پلاسميد نوتركيب pBI-DAB داراي ژنdabb1 به سويه باكتريايي Agrobacterium tumefasciens LBA 4404 منتقل و توسط الگوي PCRتاييد شد. ريزنمونه هاي كوتيلدوني گياه كلزا ( Brassica napus ) رقم R line hyola 308 از گياهان 6و7 روزه جداسازي وتوسط باكتري نوتركيب ترانسفرم شدند. اين ريز نمونه ها به مدت 45 روز در محيطي با غلظت 3.5 mg/L BAP غلظت هاي 5، 7.5و 10mg/L كانامايسين و 200mg/L سفاتوكسيم به منظور انتخاب گياهان تراريخت احتمالي قرارگرفتند. در نهايت حضور ژن در گياه توسط PCR وهضم آنزيمي تاييد گرديد. فعاليت ضدقارچي ان دربرابر قارچ هاي بيماريزاي كلزا در دست بررسي است.