جداسازي و كلونينگ ژن لاكتوفرين شتر عربي و بيان آن در گياه توتون

امروزه؛ با پيشرفته اي كه در زيست شناسي مولكولي، مهندسي ژنتيك و كشت بافت گياهي به دست آمده؛ روش هاي جديد و كاراتري براي غلبه به محدوديت هاي به نژآدي گياهي سنتي در ايجاد گياهان مقاوم به بيماري بوجود آمده است. در اين روش ها با بيان پروتئين هاي ضدميكروبي در گياهان ؛، مي توان گياهان مقاوم به بيماري توليد كرد. همچنين مي توان اين تركيبات ضدميكروبي توليد شده در گياهان را خالص سازي كرده و به مصارف مختلف رساند. در اين پژوهش CDS ژن لاكتوفرين از بافت پستاني شتر جداسازي شدو ابتدا در ناقل pTZ57R همسانه سازي شد. پس از جداسازي و تاييد اين توالي ژني از ناقل pTZ57R برش و در ناقل بياني pART27 تحت پروموتر35S دوگانه همسانه سازي گرديد. سازه آماده شده با استفاده از الكتروپوريشن به اگروباكتريوم سويه C58 منتقل شد. سپس با استفاده از روش ديسك برگي به گياه توتون منتقل گرديد. گياهان باززايي شده پس از تاييد تراريختي بوسيله PCR ژنوميك، PCR رويcDNA و همچنين Real Time PCR براي آزمايش ضدميكروبي بكاربرده شدند. پروتئين استخراج شده از گياهان تراريخت درمحيط in vitro اثر بازدارندگي بر عليه بيمارگرهاي جانوري و گياهي نشان داد. نتايج آزمايش CFU نشان داد كه لاكتوفرين توليدي گياهان تراريخت، اثر ممانعت كننده نسبتا بالايي روي اين بيمارگرها داشته است.