تعيين ژنوتيپ سويه هاي توكسيژنيك كلستريديوم پرفرينجنس با استفاده از روش Multiplex PCR در شترمرغ

كلستريديوم پرفرينجنس يك باكتري بي هوازي، گرم مثبت و اسپورزا است كه علاوه بر ايجاد انواع مختلف انتروكسمي در دام، به عنوان يكي از عوامل مسموميت غذايي شناسايي شده است. سويه هاي كلستريديوم پرفرينجنس حداقل 15 توكسين توليد مي كنند كه چهار گروه اصلي توكسين اين باكتري شامل (a)، (B)، (E) و (i) مي باشد. جهت شناسايي ژنوتيپ هاي مختلف اين باكتري روش هاي متفاوتي وجود دارد. هدف از انجام اين تحقيق استفاده از روشهاي پيشرفته ي مولكولي به منظور تعيين ژنوتيپ هاي مختلف باكتري كلستريديوم پرفرينجنس بود. در اين مطالعه 120 نمونه مدفوع از شترمرغ هاي 12 مزرعه بطور تصادفي و در دو مرحله گرفته شد. پس از فرآوري و كشت نمونه ها، كلوني هاي حاصل از نظر ساختاري و رنگ آميزي بررسي و با استفاده از آزمايش هاي بيوشيميايي، گونه ي آنها شناسايي شد. استخراج DNA فقط بر روي كلستريديوم پرفرينجنس انجام شد. واكنش PCR با پرايمرهاي اختصاصي هر تيپ انجام و سپس جهت تعيين ژنوتيپ سويه هاي كلستريديوم پرفرينجنس ، از روش Multiplex PCR استفاده شد. تنها تيپ جدا شده ي كلستريديوم پرفرينجنس تيپ A بود كه جداسازي انواع كلستريديا از شترمرغ و تعيين ژنوتيپ كلستريديوم پرفرينجنس با روش Multiplex PCR براي اولين بار در دنيا، توسط اين مطالعه در ايران انجام گرديد.