كاربردmiRNA مصنوعي در بهبود بيان فاكتور9 انساني

هموفيلي B يك بيماري ارثي است كه در نتيجه حذف و ياكاهش فاكتور 9 فعال در خون ايجاد مي شود. فاكتور9 طي مراحل بلوغ خود متصل برخي تغييرات پس از ترجمه مي شود. از جمله اين تغييرات كربوكسيله شدن 12 اسيد آمينه گلوتاميكاسيد است. اين كربوكسيلاسيون توسط آنزيم گاما كربوكسيلاز انجام مي شود. پروتئيني بنام كالومنين مهار كننده اين آنزيم است. RNAi يك استراتژي شناخته شده براي خاموش سازي ژن ها است. miRNA ها، به عنوان يكي از مركزي ترين عوامل تنظيم كننده بيان بسياري از ژنها محسوب مي شوند. عمل تنظيمي آن ها برپايه جفت شدن توالي هاي 2-8 نوكلئوتيدي miRNAبالغ با mRNA هدف است. هدف ما در اين تحقيق طراحي يك miRNA مصنوعي عليه كالومنين است. موادو روش ها ازبانك اطلاعاتي NCBI جهت دستيابي به توالي نوكلئوتيدي و پروتئيني ژن هاي فاكتور9 و كالومنين انساني استفاده شد. براي طراحي siRNA از برنامه Dharmacon استفاده شد. بررسي ساختارهاي ثانويه RNA توسط برنامه mFold انجام شد. نتايج و بحث: بررسي توسط برنامه mFoldنشان دادكه miRNA طراحي شده مي تواند مانند miRNA طبيعي ساختار stem-loop تشكيل دهد. مطالعات قبلي نشان داده اند كه خاموش سازي كالومنين توسط siRNA باعث فعاليت 5 برابري گاما كربوكسيلاز مي شود. پس مي توان از اين miRNA مصنوعي براي مهار كالومنين استفاده كرد تا باعث افزايش فاكتور 9 فعال شد.